Գենի ուժեղացման և գեների կլոնավորման հիմնական տարբերությունն այն է, որ գենի ամպլիֆիկացիան պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի միջոցով in vitro հետաքրքրող գենի բազմաթիվ պատճենների պատրաստման գործընթաց է: Սակայն գենի կլոնավորումը հետաքրքրություն ներկայացնող գենի բազմաթիվ պատճենների ստեղծման գործընթաց է in vivo-ում՝ ստեղծելով ռեկոմբինանտ պլազմիդ և այն վերածելով հյուրընկալող բակտերիաի::
Գենը ԴՆԹ-ի հատուկ հատված է, որը ծածկում է սպիտակուցը: Օրգանիզմն ունի հազարավոր գեներ։ Ավելին, հնարավոր է բազմապատկել կարևոր գեների ԴՆԹ-ի հաջորդականությունները՝ օգտագործելով մոլեկուլային կենսաբանական տեխնիկա։ Գենի ուժեղացումը և գեների կլոնավորումը երկու նման ընթացակարգեր են:Երկու ընթացակարգերն էլ առաջացնում են հետաքրքրող գենի բազմաթիվ պատճեններ: Այնուամենայնիվ, կա տարբերություն գեների ամպլիֆիկացիայի և գեների կլոնավորման միջև՝ իրենց մեթոդաբանության առումով:
Ի՞նչ է գենի ուժեղացումը:
Գենի ուժեղացումն պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի միջոցով որոշակի գենի պատճենների պատրաստման գործընթաց է: Գենն ուժեղացնելու համար տվյալ օրգանիզմի ԴՆԹ-ն պետք է արդյունահանվի՝ օգտագործելով ԴՆԹ-ի արդյունահանման պատշաճ արձանագրություն: Այնուհետև արդյունահանված երկշղթա ԴՆԹ-ն պետք է այլասերվի՝ առանձնացված միաշղթաներ ստանալու համար: Հաջորդ քայլը ներառում է PCR ռեակցիայի օգտագործումը հետաքրքրող գենի պատճենները պատրաստելու համար: Ավելին, PCR խառնուրդը պարունակում է անհրաժեշտ պրայմերներ, նուկլեոտիդներ, ԴՆԹ պոլիմերազային ֆերմենտ, ձևանմուշ ԴՆԹ և այլ բաղադրիչներ: ՉԺՀ ծրագրի ավարտին տեղի է ունենում հետաքրքրող գենի ուժեղացում։
Նկար 01. Գենի ուժեղացում
Ավելին, գենի ամպլիֆիկացիան նախնական քայլ է կոնկրետ հաջորդականության հայտնաբերման, օրգանիզմի նույնականացման, հիվանդությունների ախտորոշման և գենային գրադարանների ստեղծման և այլնի համար:
Ի՞նչ է գեների կլոնավորումը:
Գենի կլոնավորումը գենային ճարտարագիտության մեթոդ է՝ ստեղծելու գենային գրադարաններ կամ ստեղծելու հետաքրքրող գենի բազմաթիվ պատճեններ: Այս գործընթացը ներառում է ռեկոմբինանտ պլազմիդի պատրաստում և ռեկոմբինանտ պլազմիդի վերափոխումը հյուրընկալող բջիջի, հատկապես բակտերիալ բջիջի: Կլոնը բնօրինակ օրգանիզմի կամ մոլեկուլի նույնական պատճենն է։ Գենի կլոնավորումը կարող է ստեղծել հազարավոր գենային կլոններ։
Գծապատկեր 02. Գենի կլոնավորում
Հենց հետաքրքրող գենը նույնականացվի, այն կարելի է առանձնացնել որոշակի օրգանիզմի գենոմից՝ սահմանափակելով այն հատուկ սահմանափակող ֆերմենտներով:Այնուհետև օգտագործելով նույն սահմանափակող ֆերմենտը, պլազմիդները (վեկտորները) պետք է բացվեն՝ գենի բեկորը տեղադրելու համար: Այնուհետև ռեկոմբինանտ պլազմիդը վերածվում է հյուրընկալ մանրէի՝ օգտագործելով տարբեր մեթոդներ, ինչպիսիք են էլեկտրոպորացիան: Ռեկոմբինանտ պլազմիդներից մի քանիսը մտնում են հյուրընկալող բակտերիալ բջիջներ: Օգտագործելով հակաբիոտիկ՝ փոխակերպված բակտերիաները կարելի է ընտրել, մեկուսացնել և մշակել թարմ միջավայրում: Այսպիսով, այս տեխնիկան օգնում է ձեռք բերել միլիոնավոր գենային կլոններ:
Որո՞նք են նմանությունները գենի ուժեղացման և գեների կլոնավորման միջև:
- Գենի ուժեղացումը և գեների կլոնավորումը երկու մոլեկուլային կենսաբանական տեխնիկա են:
- Այս երկու տեխնիկայում էլ ԴՆԹ-ի որոշակի հաջորդականությունը կամ գենը բազմապատկվում են միլիոններով կամ հազարավոր անգամներով:
- Ավելին, երկու տեխնիկան էլ մեծ նշանակություն ունեն գիտական շատ ոլորտների համար:
Ո՞րն է տարբերությունը գենի ուժեղացման և գենի կլոնավորման միջև:
Գենի ուժեղացումը գործընթաց է, որը ստեղծում է որոշակի գենի պատճեններ՝ օգտագործելով in vitro մեթոդը, որը կոչվում է PCR:Մյուս կողմից, գենի կլոնավորումը գործընթաց է, որը ստեղծում է որոշակի գենի պատճեններ՝ օգտագործելով in vivo մեթոդը՝ ռեկոմբինանտ վեկտորների կառուցման և կենդանի օրգանիզմում դրանք բազմապատկելու միջոցով: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է գեների ուժեղացման և գեների կլոնավորման միջև: Ավելին, գեների ուժեղացումը տևում է ընդամենը մի քանի ժամ, մինչդեռ գեների կլոնավորումը մի քանի օր է տևում ավարտին: Հետևաբար, մենք կարող ենք սա համարել նաև որպես տարբերություն գենի ամպլիֆիկացիայի և գեների կլոնավորման միջև: Ավելին, գեների ուժեղացման գործընթացը ցույց է տալիս ավելի քիչ սխալներ, մինչդեռ գեների կլոնավորման գործընթացը ցույց է տալիս ավելի շատ սխալներ:
Հետևյալ ինֆոգրաֆիկան ամփոփում է գենի ուժեղացման և գեների կլոնավորման միջև եղած տարբերությունը:
Ամփոփում – Գենի ուժեղացում ընդդեմ գեների կլոնավորման
Գենի ուժեղացումը ցանկալի գենի պատճենների պատրաստման գործընթաց է՝ օգտագործելով պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա in vitro պայմաններում, մինչդեռ գենի կլոնավորումը հետաքրքրություն ներկայացնող գենի պատճենների պատրաստման գործընթաց է՝ օգտագործելով ռեկոմբինանտ ԴՆԹ-ի մոլեկուլը և կենդանի օրգանիզմը/հյուրընկալողը: մանրէ. Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է գեների ուժեղացման և գեների կլոնավորման միջև:
