Հիմնական տարբերություն – տրանսֆորմատորներ ընդդեմ ռեկոմբինանտների
Վերհամակցումը և փոխակերպումը գենետիկական ինժեներիայի երկու կարևորագույն քայլերն են, որտեղ օրգանիզմի բնութագրերը միտումնավոր ձևափոխվում են՝ մանիպուլյացիայի ենթարկելով նրա գենետիկական նյութը: Ռեկոմբինացիան գործընթաց է, որի ընթացքում օտար ԴՆԹ-ն ներառվում է վեկտորի գենոմում և ձևավորվում է ԴՆԹ-ի ռեկոմբինանտ մոլեկուլ: Տրանսֆորմացիան հաջորդ քայլն է, երբ ռեկոմբինանտ մոլեկուլը մտնում է ընդունող օրգանիզմ: Ընդունող բջիջը կամ օրգանիզմը նպաստում է ռեկոմբինանտ մոլեկուլի արտահայտմանը: Տրանսֆորմանտների և ռեկոմբինանտների հիմնական տարբերությունն այն է, որ փոխակերպիչները բջիջներն են կամ օրգանիզմները, որոնք ներս են վերցնում ռեկոմբինանտ մոլեկուլը և հեշտացնում արտահայտումը, մինչդեռ ռեկոմբինանտները այն վեկտորներն են, որոնք թույլ են տալիս օտար ԴՆԹ-ն ներդնել իր գենոմի մեջ և տեղափոխել հյուրընկալող տրանսֆորմատորներ՝ արտահայտվելու համար:
Ի՞նչ են տրանսֆորմատորները:
Տրանսֆորմատորներն այն բջիջներն են կամ օրգանիզմները, որոնցում արտահայտման համար ընդունվում է ռեկոմբինանտ ԴՆԹ: Բակտերիաները սովորաբար օգտագործվում են որպես ընդունող օրգանիզմներ գենետիկական ճարտարագիտության մեջ, քանի որ դրանք հեշտ է աճել, բազմապատկվել և մշակվել լաբորատոր պայմաններում, իսկ փոխակերպման գործընթացը հեշտ է համեմատած այլ օրգանիզմների հետ: Գենային ճարտարագիտության մեջ օգտագործվող ամենատարածված հյուրընկալ բակտերիան E coli բակտերիան է:
Վերափոխման գործընթացի ընթացքում հյուրընկալող բջիջները դրդվում են ընդունելու ռեկոմբինանտները: Այնուամենայնիվ, որոշ ընդունող բջիջներ չեն ընդունում ռեկոմբինանտ մոլեկուլներ: Նրանք հայտնի են որպես ոչ տրանսֆորմատորներ, իսկ բջիջները, որոնք պարունակում են ռեկոմբինանտ ԴՆԹ մոլեկուլներ, հայտնի են որպես տրանսֆորմատորներ: Ոչ տրանսֆորմանտներից տրանսֆորմանտների ընտրությունը կատարվում է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ ընտրվող մարկերների միջոցով: Ընտրելի մարկերները տեղադրվում են վեկտորի գենոմում ԴՆԹ-ի ներդիրի հետ միասին: Սովորաբար օգտագործվող ընտրվող մարկերները հակաբիոտիկների դիմացկուն գեներն են:Մարկերային գեները հեշտացնում են տրանսֆորմանտների տարբերակումը և շարունակում են գործընթացը: Փոխակերպման գործընթացից հետո բակտերիան աճեցվում է հակաբիոտիկ պարունակող միջավայրում: Միայն տրանսֆորմանտներն են ունակ աճելու այդ միջավայրում, քանի որ նրանք ունեն ռեկոմբինանտներ ներսում։
Երբ ռեկոմբինանտ ԴՆԹ-ի մոլեկուլը փոխակերպվում է հյուրընկալող օրգանիզմի ներսում, օտար ԴՆԹ-ն կարող է կամ ինտեգրվել հյուրընկալող բջջի գենոմին կամ մնալ ոչ ինտեգրված ցիտոպլազմայում: Այնուամենայնիվ, օտար ԴՆԹ-ի արտահայտությունը և վերարտադրությունը տեղի է ունենում հյուրընկալող օրգանիզմում և տալիս է գործընթացի ցանկալի արդյունքը:
Ի՞նչ են ռեկոմբինանտները:
Ռեկոմբինանտը օրգանիզմ կամ բջիջ է, որն ունի օտար ԴՆԹ պարունակող վերահամակցված գենոմ: Ռեկոմբինանտները գենետիկական ինժեներիայի գործընթացի արդյունք են:Դրանք արհեստականորեն կառուցվում են in vitro՝ ներդնելով հետաքրքրող գեները և փոփոխելով գենոմը: Հաճախ բակտերիալ պլազմիդները և բակտերիոֆագները հանդես են գալիս որպես ռեկոմբինանտներ գենային ինժեներիայում: Այն ունի տարբեր ԴՆԹ-ների քիմերա։ Ռեկոմբինանտ ԴՆԹ-ի մոլեկուլը օտար ԴՆԹ է տեղափոխում հյուրընկալող օրգանիզմ և ստիպում է այն արտահայտել և ձևավորել ցանկալի արտադրանքը:
Ռեկոմբինանտ մոլեկուլները կառուցվում են սահմանափակող էնդոնուկլեազների և ԴՆԹ-ի լիգազների միջոցով: ԴՆԹ-ի ցանկալի բեկորն առանձնացվում է սկզբնական օրգանիզմից և տեղադրվում վեկտորի մեջ՝ վերածելու համար ռեկոմբինանտը պատրաստելու համար: Հետաքրքրվող գենի կտրումը և վեկտորային օրգանիզմի բացումը պետք է կատարվի նույն սահմանափակող ֆերմենտի միջոցով՝ դրանք միմյանց միացնելու համար համատեղելի կպչուն ծայրեր ստեղծելու համար: Երբ օտար ԴՆԹ-ն ներառվում է վեկտորի գենոմում, այն հայտնի է որպես ռեկոմբինանտ կամ ռեկոմբինանտ ԴՆԹ մոլեկուլ:
Նկար 02. Ռեկոմբինանտ ԴՆԹ
Ո՞րն է տարբերությունը տրանսֆորմանտների և ռեկոմբինանտների միջև:
Transformants vs Recombinants |
|
| Տրանսֆորմանտները այն բջիջներն են, որոնց ներսում կա ռեկոմբինանտ ԴՆԹ մոլեկուլ: | Ռեկոմբինանտները կրող մոլեկուլներ են, որոնց օտար ԴՆԹ-ն տեղադրված է սեփական գենոմում: |
| Օտար ԴՆԹ-ի արտահայտում | |
| Դրանք ընդունող բջիջներն են, որոնք ունակ են արտահայտել ռեկոմբինանտ ԴՆԹ: | Նրանք պետք է կարողանան ինքնուրույն վերարտադրվել հյուրընկալող օրգանիզմի ներսում: |
| Ընտրություն | |
| Բջիջները, որոնք կարող են հեշտությամբ աճել և բազմապատկվել, ընտրվում են որպես հյուրընկալող բջիջներ: | Դրանք պետք է հեշտությամբ արդյունահանվեն և պետք է պարունակեն ընտրովի մարկերներ: |
Ամփոփում – Փոխակերպիչներ ընդդեմ ռեկոմբինանտների
Տրանսֆորմանտները այն բջիջներն են կամ օրգանիզմները, որոնց ներսում կան ԴՆԹ-ի ռեկոմբինանտ մոլեկուլներ: Ռեկոմբինանտներն այն օրգանիզմներն են կամ բջիջները, որոնք ենթարկվել են գենետիկական ռեկոմբինացիայի և ունեն օտար ԴՆԹ իրենց գենոմներում: Բակտերիալ բջիջները հաճախ օգտագործվում են որպես հյուրընկալող բջիջներ փոխակերպման համար, իսկ պլազմիդներն ու բակտերիոֆագները հաճախ օգտագործվում են որպես վեկտորներ ռեկոմբինանտ ԴՆԹ տեխնոլոգիայում: Սա է տրանսֆորմանտների և ռեկոմբինանտների տարբերությունը:
