HPLC-ի և արագ HPLC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ պոմպի ճնշումը, որը մենք օգտագործում ենք HPLC-ի համար, մոտ 40 ՄՊա է, մինչդեռ արագ HPLC-ի համար պոմպի ճնշումը մոտ 3-5 ՄՊա է:
Ամենատարածված տեխնիկան, որը մենք օգտագործում ենք խառնուրդի բաղադրիչները բաժանելու համար, «հեղուկ քրոմատոգրաֆիան» է: Այս նպատակին հասնելու համար կան մի քանի տեխնիկա, որոնցից HPLC-ն շատ տարածված է: HPLC-ն նշանակում է «High Performance Liquid Chromatography», որը նույնականացնում, քանակական և տարանջատում է հեղուկ խառնուրդի բաղադրիչները արագ և արդյունավետ եղանակով: Արագ HPLC-ն HPLC-ի հատուկ կիրառություն է, որը վերջերս գրավել է լուծումների ուսումնասիրությամբ զբաղվողների ուշադրությունը:
Ի՞նչ է HPLC-ն:
HPLC-ը բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրություն է: Այն օգտագործում է բարձր ճնշում՝ լուծիչները մղելու համար, որպեսզի նրանք անցնեն սյունակի միջով: Բացի այդ, դա իդեալական միջոց է տարանջատելու և ուսումնասիրելու տարբեր միացություններ, ինչպիսիք են ամինաթթուները, նուկլեինաթթուները, ածխաջրերը, ստերոիդները, հակաբիոտիկները և ածխաջրածինները: HPLC-ն շատ առավելություններ ունի խառնուրդների բաժանման այլ մեթոդների նկատմամբ, ինչպիսիք են ավելի բարձր լուծաչափը և ավելի արագ վերլուծությունը: Այն վերացնում է վերափաթեթավորման և վերածնման անհրաժեշտությունը և ավելի լավ վերահսկում է պարամետրերը և, հետևաբար, մեծացնում է տարանջատման արդյունավետությունը: Իդեալում, HPLC-ն հարմար է լայնածավալ կիրառությունների համար, քանի որ այն կարող է առանձնացնել շատ փոքր մասնիկներ և թույլ է տալիս օգտագործել բարձր ճնշումներ, որոնք հեշտացնում են լուծիչների հեշտ հոսքը:
Նկար 01. HPLC սյունակ
Հակիրճ, HPLC տեխնիկայի շահագործման եղանակը հետևյալն է. Նախ, մենք պետք է նմուշը ներմուծենք շարժական փուլի հոսքի մեջ առանձին փոքր քանակությամբ՝ օգտագործելով պոմպ: Պոմպի ճնշումը պետք է պահպանվի 40 ՄՊա: Շարժական փուլի այս հոսքը թափանցում է HPLC-ի սյունակի միջով: Այնուհետեւ, նմուշի բաղադրիչները նույնպես անցնում են սյունակի միջով: Այնուամենայնիվ, նրանց շարժման արագությունները տարբերվում են միմյանցից, քանի որ տարբերվում են նմուշի բաղադրիչների և սյունակի ներսում ներծծող նյութի փոխազդեցությունը: Մենք այս կլանիչը անվանում ենք անշարժ փուլ, քանի որ այն գտնվում է սյունակի ներսում (չի շարժվում): Այնուհետև սյունակի վերջում մենք կարող ենք հավաքել նմուշը, որը դուրս է գալիս սյունակից, այդպիսով մենք կարող ենք առանձին հավաքել նմուշի բաղադրիչները։
Ի՞նչ է արագ HPLC-ն:
Վերջերս Schering Plow գիտահետազոտական ինստիտուտի հետազոտող գիտնականները մշակեցին արագ HPLC տեխնիկա, որը HPLC-ի առաջադեմ տարբերակն է, քանի որ այն թույլ է տալիս միացությունների էլ ավելի արագ տարանջատում խառնուրդից:Նաև, որը հայտնի է որպես արագ HPLC, այս տեխնիկան օգտագործում է 2,7 մմ միաձուլված միջուկային սիլիցիումի մասնիկներ, որոնք ստացվում են 0,5 մմ ծակոտկեն սիլիցիումի միաձուլման միջոցով պինդ սիլիցիումի մասնիկի վրա: Այս եզակի պատրաստված մասնիկները բաժանման պրոցեդուրան շատ արագ են դարձնում, և դա նույնպես ցածր ճնշման տակ, քան այն, ինչ մենք օգտագործում ենք HPLC-ում:
Նկար 02. FPLC ապարատ
Արագ HPLC-ն ստանում է արդյունքներ, որոնք համեմատելի են UPLC-ի հետ, սակայն գիտնականները կարծում են, որ այս տեխնիկան գերազանցում է, քանի որ այն չի պահանջում շատ թանկարժեք գերբարձր ճնշման սարքավորումներ: Հիանալին այն է, որ արագ HPLC-ն չի պահանջում որևէ նոր լաբորատոր արձանագրություն:
Ո՞րն է տարբերությունը HPLC-ի և արագ HPLC-ի միջև:
HPLC-ն բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրություն է, իսկ արագ HPLC-ն բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրության առաջադեմ ձև է:HPLC-ի և արագ HPLC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ պոմպի ճնշումը, որը մենք օգտագործում ենք HPLC-ի համար, մոտ 40 ՄՊա է: Մինչդեռ արագ HPLC-ի համար պոմպի ճնշումը մոտ 3-5 ՄՊա է: Ավելին, մենք կարող ենք առանձնացնել տարբեր միացություններ, ինչպիսիք են ամինաթթուները, նուկլեինաթթուները, ածխաջրերը, ստերոիդները, հակաբիոտիկները և ածխաջրածինները՝ օգտագործելով HPLC տեխնիկան, մինչդեռ արագ HPLC տեխնիկան հիմնականում օգտագործվում է սպիտակուցների տարանջատման համար:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ավելի շատ տեղեկատվություն է ներկայացնում HPLC-ի և արագ HPLC-ի տարբերության մասին:
Ամփոփում – HPLC ընդդեմ Արագ HPLC
HPLC-ն հեղուկ քրոմատագրության տեխնիկա է, որը շատ տարածված է դարձել ամբողջ աշխարհում: Fast HPLC-ն HPLC-ի նոր տարբերակն է, Schering Plow Institute-ի հետազոտող գիտնականները մշակել են այս նոր տեխնիկան:HPLC-ի և արագ HPLC-ի հիմնական տարբերությունը պոմպի ճնշման վրա է, որը մենք օգտագործում ենք տարանջատման համար: Այն է; պոմպի ճնշումը, որը մենք օգտագործում ենք HPLC-ի համար, մոտ 40 ՄՊա է: Սակայն արագ HPLC-ի համար պոմպի ճնշումը մոտ 3-5 ՄՊա է։
