HEK293-ի և HEK293t-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ HEK293-ը մարդու սաղմնային երիկամից ստացված անմահացած բջջային գիծ է, որը տրանսֆեկցված է խուզված մարդու ադենովիրուս տիպի 5DNA-ով, մինչդեռ HEK293t-ը դուստր բջջային գիծ է՝ ստացված HEK293 բնօրինակ բջջային գծից: տրանսֆեկցված է պլազմիդային վեկտորով, որը կրում է SV40 վերարտադրության սկիզբը:
Տրանսֆեկցիան սովորաբար սահմանվում է որպես օտար ԴՆԹ և ՌՆԹ բջիջներ ներմուծելու գործընթաց՝ դրանց գենոտիպի և ֆենոտիպի վրա ազդելու նպատակով: Օտար նուկլեինաթթուների նման ներմուծումը տարբեր կենսաբանական, քիմիական և ֆիզիկական մեթոդներով կարող է փոխել բջջի հատկությունները։Ի վերջո, սա թույլ է տալիս ուսումնասիրել գենի գործառույթը և սպիտակուցի արտահայտումը բջջի համատեքստում: HEK293-ը և HEK293t-ը երկու բջջային գծեր են, որոնք երկար տարիներ լայնորեն օգտագործվել են բջջային կենսաբանության հետազոտության մեջ՝ տրանսֆեկցիայի իրենց հակվածության պատճառով:
Ինչ է HEK293?
HEK293-ը մարդու սաղմնային երիկամից ստացված անմահացած բջջային գիծ է, որը փոխակերպվում է 5-րդ տիպի մարդկային ադենովիրուսի կտրված ԴՆԹ-ով՝ արտադրելով բազմաթիվ ռեկոմբինանտ սպիտակուցներ: HEK293-ներն ի սկզբանե մեկուսացվել են մարդու երիկամների բջիջներից հոլանդացի կենսաբան Ալեքս Վան դեր Էբի կողմից 1973 թվականին: Այս բջիջները աճեցվել են իգական սեռի պտղի հյուսվածքային կուլտուրայում: Ավելի ուշ, Վան դեր Էբի լաբորատորիայի հետդոկտոր Ֆրենկ Գրեհեմի կողմից նրանց տրանսֆեկցեցին 5-րդ տիպի մարդկային ադենովիրուսի կտրված ԴՆԹ-ով: Այս բջջային գիծն անվանվել է HEK293, քանի որ դա Ֆրենկի 293րդ փորձն էր:
Նկար 01. HEK293
Ադենովիրուսային գեների ներառումը HEK բջջի գենոմում այս բջիջներին հնարավորություն է տալիս շատ արդյունավետ կերպով արտադրել մեծ քանակությամբ ռեկոմբինանտ սպիտակուցներ: Ավելին, ադենովիրուսային վեկտորը պարունակում է CMV խթանող շրջան; հետևաբար, այն ավելի է մեծացնում այս արդյունավետությունը: Այս բջջային գիծն օգտագործվել է որպես գենային արտահայտման ուսումնասիրությունների հյուրընկալող: Այս բջջային գիծը օգտագործվում է նաև կենսատեխնոլոգիայի արդյունաբերության կողմից՝ գենային թերապիայի համար բուժական սպիտակուցներ արտադրելու համար:
Ի՞նչ է HEK293t?
HEK293t-ը դուստր բջջային գիծ է՝ ստացված HEK293 սկզբնական բջջային գծից, որը փոխակերպվում է SV40 վերարտադրության սկզբնաղբյուր կրող պլազմիդային վեկտորով՝ արտադրելու մեծ քանակությամբ ռեկոմբինանտ սպիտակուցներ: HEK293t-ը մարդկային բջջային գիծ է, որն արտահայտում է SV40 մեծ T անտիգենի մուտանտ տարբերակը: HEK293t-ը ստեղծվել է Միշել Կառլոսի լաբորատորիայում՝ Սթենֆորդում HEK29E բջջային գծի կայուն տրանսֆեկցիայի միջոցով պլազմիդի միջոցով, որը կոդավորում է SV40 մեծ T անտիգենի ջերմաստիճանի նկատմամբ զգայուն մուտանտը:Այն ի սկզբանե կոչվում էր 293/tsA1609neo: Դա պայմանավորված է նրանով, որ տրանսֆեկցիան օգտագործվում է բջջային գիծ ստեղծելու համար, որն ապահովում է նեոմիցինի դիմադրություն և SV40 մեծ T հակագենի tsA 1609 ալելի արտահայտում:
Նկար 02. HEK293t
SV40 մեծ T անտիգենի մուտանտ տարբերակի արտահայտման շնորհիվ, SV 40 վերարտադրման սկզբնաղբյուր ունեցող պլազմիդները կարող են զգալիորեն մեծացնել ռեկոմբինանտ սպիտակուցի քանակը: Այս բջջային գիծը սովորաբար օգտագործվում է կենսատեխնոլոգիական արդյունաբերության մեջ՝ սպիտակուցների արտահայտման և ռեկոմբինանտ ռետրովիրուսների արտադրության համար։
Որո՞նք են նմանությունները HEK293-ի և HEK293t-ի միջև:
- HEK293-ը և HEK293t-ը երկու բջջային գծեր են, որոնք լայնորեն օգտագործվել են բջջային կենսաբանության հետազոտության մեջ՝ տրանսֆեկցիոն հակվածության պատճառով:
- Երկու բջջային գծերն էլ լաբորատոր են:
- Այս բջջային գծերը կարող են զգալիորեն մեծացնել ռեկոմբինանտ սպիտակուցի արտադրությունը:
- Սրանք ստացվում են մարդու սաղմնային երիկամների բջիջները պլազմիդային վեկտորով փոխակերպելու միջոցով:
Ո՞րն է տարբերությունը HEK293-ի և HEK293t-ի միջև:
HEK293-ը մարդու սաղմնային երիկամից ստացված անմահացած բջջային գիծ է, որը տրանսֆեկցված է 5-րդ տիպի մարդկային ադենովիրուսի կտրված ԴՆԹ-ով: Ի հակադրություն, HEK293t-ը դուստր բջջային գիծ է, որը ստացվել է HEK293 սկզբնական բջջային գծից, որը տրանսֆեկցված է SV40 վերարտադրության սկզբնաղբյուր կրող պլազմիդային վեկտորով: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է HEK293-ի և HEK293t-ի միջև: Ավելին, HEK293-ը չի արտահայտում SV40 մեծ T անտիգենի մուտանտ տարբերակը: Մյուս կողմից, HEK293t-ն արտահայտում է SV40 մեծ T հակագենի մուտանտ տարբերակը:
Հետևյալ ինֆոգրաֆիկան ցույց է տալիս HEK293-ի և HEK293t-ի տարբերությունները աղյուսակային տեսքով՝ կողք կողքի համեմատելու համար:
Ամփոփում – HEK293 vs HEK293t
HEK293-ը և HEK293t-ը երկու բջջային գծեր են, որոնք լայնորեն օգտագործվել են բջջային կենսաբանության հետազոտության մեջ՝ իրենց կայուն աճի և տրանսֆեկցիայի հակվածության պատճառով: HEK293-ը հավերժացված բջջային գիծ է, որը ստացվում է սաղմնային մարդու երիկամից, որը փոխակերպվում է խուզված մարդկային ադենովիրուսի տիպի 5DNA-ով, մինչդեռ HEK293t-ը դուստր բջջային գիծ է՝ ստացված HEK293 բնօրինակ բջջային գծից, որը փոխակերպվում է SV40 վերարտադրության սկզբնաղբյուր կրող պլազմիդ վեկտորով: Այսպիսով, սա ամփոփում է HEK293-ի և HEK293t-ի միջև եղած տարբերությունը։
