Ռադիոիմունովերլուծության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության հիմնական տարբերությունն այն է, որ ռադիոիմունավերլուծության ժամանակ չափվող նմուշը կամ միացությունը համակցվում է ռադիոակտիվ հակագենի հետ, մինչդեռ իմունորադիոմետրիկ վերլուծության դեպքում նմուշը կամ միացությունը անմիջապես միանում է ռադիոպիտակավորվածի հետ: հակամարմիններ.
Իմունովերլուծությունը կենսաքիմիական թեստ է, որը հայտնաբերում է մակրոմոլեկուլների առկայությունը կամ կոնցենտրացիան լուծույթում՝ օգտագործելով հակամարմին կամ հակագեն: Լյումինեսցենտային և ռադիոակտիվ հակամարմինները օգտագործվում են նմուշում անտիգենները չափելու համար: Սկզբում հակամարմինները օգտագործվում էին տեղումների կիրառման մեթոդներում, ինչպիսիք են իմունային նստվածքը, իմունոդիֆուզիան և իմունաէլեկտրոֆորեզը շիճուկի սպիտակուցի վերլուծության համար:Ներկայումս դեղերի, ուռուցքային մարկերների և հորմոնների չափման համար օգտագործվում են խիստ զգայուն մեթոդներ, ինչպիսիք են ռադիոիմունային անալիզը և իմունորադիոմետրիկ անալիզը:
Ի՞նչ է ռադիոիմունային անալիզը:
Radioimmunoassay-ը (RIA) իմունային անալիզ է, որն օգտագործում է ռադիոակտիվ տարրեր հակագեն-հակամարմին համալիրների փուլային ձևավորում: ՌԻԱ-ն սովորաբար օգտագործում է ռադիոակտիվ հակամարմիններ՝ նմուշում անտիգենի քանակը հայտնաբերելու համար: RIA-ն շատ կոնկրետ և բարձր զգայուն in vitro վերլուծություն է: RIA-ի հիմքում ընկած սկզբունքը մրցակցային պարտադիր է: Այստեղ ռադիոակտիվ հակագենը մրցում է ոչ ռադիոակտիվ անտիգենի դեմ հակամարմինների կամ ընկալիչների կապող վայրերի մշտական քանակի համար: RIA-ն պահանջում է հատուկ լիցենզավորում և նախազգուշական միջոցներ, քանի որ օգտագործվում են ռադիոակտիվ նյութեր և այն մնում է ամենաէժան տեխնիկայի շարքում:
Գծապատկեր 01. Իմունովերլուծություն
ՌԻԱ-ի ժամանակ անտիգենի հայտնի քանակությունը հաճախ դառնում է ռադիոակտիվ՝ այն պիտակավորելով թիրոզինին կցված յոդի գամմա-ռադիոակտիվ իզոտոպներով: Այնուհետեւ այս անտիգենը զուգակցվում է հայտնի քանակությամբ հակամարմինների հետ: Այստեղ և՛ հակագենը, և՛ հակամարմինները հատուկ կապվում են միմյանց հետ: Այնուհետև ավելացվում է արյան շիճուկի նմուշ՝ պիտակավորված անտիգենների և հատուկ հակամարմիններով շիճուկում չպիտակավորված անտիգենների միջև մրցակցային ռեակցիա սկսելու համար: Այս ռեակցիայի ժամանակ հակամարմինները թողարկում են որոշակի քանակությամբ պիտակավորված հակագեն: Այս քանակությունը համաչափ է պիտակավորված և չպիտակավորված հակագենի հարաբերակցությանը: Վերջապես, ստեղծվում է կապող կոր՝ հիվանդի արյան շիճուկում անտիգենի քանակությունը ստանալու համար:
Ի՞նչ է իմունորադիոմետրիկ վերլուծությունը:
Իմունոռադիոմետրիկ անալիզը (IRMA) իմունային անալիզ է, որն օգտագործում է ռադիոպիտակավորված հակամարմիններ: IRMA-ում հակամարմինները պիտակավորված են ռադիոիզոտոպների միջոցով: Այս հակամարմինները կապվում են կոնկրետ նմուշում առկա անտիգենների հետ:Դրական նմուշում հակամարմինները, որոնք ռադիոակտիվ պիտակավորված են, կապվում են անտիգենների ազատ էպիտոպների հետ: Սա ստեղծում է հակագեն-հակամարմին համալիր:
Երկրորդ ռեակցիայի ընթացքում պիտակավորված հակամարմինները, որոնք չկապված են, հեռացվում են պինդ ֆազային հակագենի միջոցով: Լուծույթում ռադիոակտիվ հակամարմինների մնացած քանակը հակագենի կոնցենտրացիայի անմիջական գործառույթն է: IRMA-ն հայտնի է որպես ռեագենտի ավելցուկային վերլուծություն, որտեղ որպես ռեագենտ օգտագործվում է ռադիոպիտակավորված հակամարմինների ավելցուկային քանակություն: Այստեղ պիտակավորված հակամարմինների կամ հակագենի ավելցուկային կոնցենտրացիան թույլատրվում է արձագանքել: Որպես վերջնական քայլ, հակագենով կապված և ազատ հակամարմինները բաժանվում են, և անտիգենով կապված ֆրակցիան ենթարկվում է ռադիոակտիվ վերլուծությունների: Այստեղ ֆրակցիայի ակտիվությունն ուղիղ համեմատական է անտիգենի կոնցենտրացիային։
Որո՞նք են նմանությունները ռադիոիմունովերլուծության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության միջև:
- Եվ ռադիոիմունովերլուծությունը և իմունորադիոմետրիկ անալիզը իմունային անալիզներ են, որոնք օգտագործում են ռադիոակտիվ տարրեր հակագեն-հակամարմին բարդույթների փուլային ձևավորման համար:
- Նրանք կազմում են հակագեն-հակամարմին համալիր:
Ո՞րն է տարբերությունը ռադիոիմունովերլուծության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության միջև:
Radioimmunoassay-ը իմունային անալիզ է, որը որոշում է հակամարմինների մակարդակը ռադիոիզոտոպով պիտակավորված հակագենի միջոցով, մինչդեռ իմունորադիոմետրիկ վերլուծությունը ռեագենտի ավելցուկային վերլուծություն է, որն օգտագործում է ռադիոպիտակավորված հակամարմինների ավելցուկային կոնցենտրացիան: Այսպիսով, սա ռադիոիմունովերլուծության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության հիմնական տարբերությունն է: IRMA-ն ի վիճակի է ապահովել ավելի բարձր զգայունություն, քան RIA-ն: RIA-ում անտիգենները պիտակավորված են յոդի գամմա-ռադիոակտիվ իզոտոպներով, մինչդեռ IRMA հակամարմինները պիտակավորված են՝ օգտագործելով յոդի իզոտոպներ: Այսպիսով, սա նաև տարբերություն է ռադիոիմունովերլուծության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության միջև: Քանի որ IRMA-ն ռեագենտի ավելցուկային տեխնիկա է, վերլուծությունը կատարվում է RIA-ից ավելի կարճ ժամանակում:
Հետևյալ աղյուսակը ամփոփում է ռադիոիմունային հետազոտության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության միջև եղած տարբերությունները:
Ամփոփում – Ռադիոիմունովերլուծություն ընդդեմ իմունորադիոմետրիկ վերլուծության
Radioimmunoassay-ը իմունային անալիզ է, որն օգտագործում է ռադիոակտիվ տարրեր փուլային ձևավորման մեջ՝ որոշելու հակամարմինների մակարդակը: RIA-ն սովորաբար օգտագործում է ռադիոակտիվ հակամարմիններ: Ռադիոակտիվ հակագենը մրցակցում է ոչ ռադիոակտիվ հակագենի դեմ հակամարմինների կամ ընկալիչների կապող վայրերի մշտական քանակի համար: Իմունորադիոմետրիկ անալիզը իմունային անալիզ է, որն իրականացվում է նմուշի հակագենի մակարդակը որոշելու համար՝ օգտագործելով ռադիոպիտակավորված հակամարմիններ: Այս հակամարմինները կապվում են կոնկրետ նմուշում առկա անտիգենների հետ: Յուրաքանչյուր վերլուծության վերջում ձևավորվում է հակագեն-հակամարմին համալիր: Վերլուծությունների արդյունքները ստանալու համար գծվում է պարտադիր կոր: Ռադիոիմունային հետազոտության ժամանակ պիտակավորված անտիգենի քանակը համաչափ է պիտակավորված և չպիտակավորված անտիգենի հարաբերակցությանը, սակայն իմունորադիոմետրիկ վերլուծության դեպքում անտիգենով կապված ֆրակցիայի ակտիվությունն ուղիղ համեմատական է անտիգենի կոնցենտրացիայի հետ: Սա ռադիոիմունային հետազոտության և իմունորադիոմետրիկ հետազոտության միջև եղած տարբերության ամփոփումն է:
