Աֆինիտի և իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիայի հիմնական տարբերությունն այն է, որ մենք կարող ենք օգտագործել մերձեցման քրոմատոգրաֆիա՝ լիցքավորված կամ չլիցքավորված բաղադրիչները խառնուրդում առանձնացնելու համար, մինչդեռ մենք կարող ենք օգտագործել իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիա՝ լիցքավորված բաղադրիչները խառնուրդում առանձնացնելու համար:
Քրոմատոգրաֆիան տեխնիկա է, որը մենք կարող ենք օգտագործել խառնուրդի մեջ ցանկալի բաղադրիչները առանձնացնելու համար: Կան տարբեր տեսակներ, ինչպիսիք են հեղուկ քրոմատոգրաֆիան, գազային քրոմատագրությունը և այլն: Հարաբերական քրոմատոգրաֆիան և իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիան հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի երկու ենթակատեգորիա են: Բացի այդ, այս տեխնիկայում կան երկու փուլ. Դրանք են՝ անշարժ և շարժական փուլը։Այս տեխնիկայի նպատակն է բաժանել բաղադրիչները, կախված բաղադրիչների կապից, շարժական փուլում ստացիոնար փուլի մակերեսին:
Ի՞նչ է մերձավոր քրոմատոգրաֆիան:
Աֆինիտային քրոմատոգրաֆիան կենսաքիմիական տեխնիկա է, որը մենք օգտագործում ենք խառնուրդում բաղադրիչները առանձնացնելու համար՝ կախված այս բաղադրիչների փոխազդեցությունից:
Փոխազդեցությունները, որոնք մենք օգտագործում ենք այս դեպքում, ներառում են հետևյալը.
- Հակագեն-հակամարմին փոխազդեցություններ
- Ֆերմենտ-սուբստրատ փոխազդեցություններ
- Ռեցեպտոր-լիգանդ փոխազդեցություններ
- Սպիտակուց-նուկլեինաթթու փոխազդեցություններ
Այս տեխնիկայում մենք օգտագործում ենք մոլեկուլների մոլեկուլային հատկությունները այս տարանջատման տեխնիկայի համար: Այստեղ մենք թույլ ենք տալիս ցանկալի միացությանը փոխազդել ստացիոնար փուլի հետ ջրածնային կապի, իոնային փոխազդեցության, դիսուլֆիդային կամուրջների, հիդրոֆոբ փոխազդեցության և այլնի միջոցով:Այն մոլեկուլները, որոնք չեն փոխազդում անշարժ փուլի հետ, առաջինը կթափվեն: Այսպիսով, մենք կարող ենք այն առանձնացնել խառնուրդից։ Ցանկալի միացությունը կմնա կցված ստացիոնար փուլին: Հետևաբար, մենք կարող ենք այն անջատել՝ օգտագործելով լուծիչ լուծիչ, և այն նաև ողողել՝ առանձնացնելու համար:
Նկար 01. Քրոմատոգրաֆիկ սյունակ
Աֆինիտե քրոմատոգրաֆիան օգտակար է բուֆերային լուծույթի միջոցով խառնուրդից նյութը մաքրելու և խտացնելու համար: Բացի այդ, այն օգտակար է խառնուրդի մեջ անցանկալի նյութերը նվազեցնելու համար: Երբ հաշվի ենք առնում այն ապարատը, որը մենք օգտագործում ենք այս գործընթացի համար, մենք պետք է օգտագործենք սյունակ, որը լցված է մեր ստացիոնար փուլով: Այնուհետև մենք պետք է բեռնենք շարժական փուլը, որը պարունակում է բիոմոլեկուլներ, որոնք մենք պատրաստվում ենք առանձնացնել:Հաջորդը, թույլ տվեք նրանց միանալ ստացիոնար փուլին: Այնուհետև, օգտագործելով լվացման բուֆեր, մենք կարող ենք առանձնացնել ոչ նպատակային բիոմոլեկուլները, բայց թիրախային մոլեկուլները պետք է բարձր կապ ունենան ստացիոնար փուլի հետ, որպեսզի հաջողվի տարանջատման գործընթացը:
Ի՞նչ է իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիան:
Իոնային քրոմատոգրաֆիան հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի ձև է, որտեղ մենք կարող ենք վերլուծել իոնային նյութերը: Հաճախ մենք օգտագործում ենք այն անօրգանական անիոնների և կատիոնների վերլուծության համար (այսինքն՝ քլորիդ և նիտրատ անիոններ և կալիում, նատրիումի կատիոններ): Թեև դա ավելի քիչ տարածված է, մենք կարող ենք նաև վերլուծել օրգանական իոնները: Ավելին, մենք կարող ենք օգտագործել այս տեխնիկան սպիտակուցների մաքրման համար, քանի որ սպիտակուցները լիցքավորված մոլեկուլներ են որոշակի pH արժեքներով: Այստեղ մենք օգտագործում ենք ամուր անշարժ փուլ, որին լիցքավորված մասնիկները կարող են միանալ: Օրինակ, մենք կարող ենք օգտագործել խեժի պոլիստիրոլ-դիվինիլբենզոլ համապոլիմերները որպես ամուր հիմք:
Նկար 02. Իոնափոխանակման քրոմատագրության փուլեր
Սա ավելի մանրամասն բացատրելու համար, ստացիոնար փուլն ունի ֆիքսված իոններ, ինչպիսիք են սուլֆատային անիոնները կամ չորրորդական ամին կատիոնները: Սրանցից յուրաքանչյուրը պետք է ասոցացվի հակաիոնի հետ (հակառակ լիցք ունեցող իոն), եթե մենք ցանկանում ենք պահպանել այս համակարգի չեզոքությունը: Այստեղ, եթե հակաիոնը կատիոն է, ապա համակարգը անվանում ենք կատիոնափոխանակման խեժ։ Բայց եթե հակաիոնը անիոն է, ապա համակարգը անիոնափոխանակման խեժ է։
Կա հինգ հիմնական փուլ իոնափոխանակման գործընթացում;
- Նախնական փուլ
- Նպատակի կլանում
- Էլյուցիայի սկիզբ
- Էլյուցիայի ավարտ
- Վերականգնում
Ո՞րն է տարբերությունը մերձեցման և իոնափոխանակման քրոմատագրության միջև:
Աֆինիտե քրոմատոգրաֆիան կենսաքիմիական տեխնիկա է, որը մենք օգտագործում ենք խառնուրդում բաղադրիչները առանձնացնելու համար՝ կախված այս բաղադրիչների միջև փոխազդեցությունից, մինչդեռ իոնային քրոմատոգրաֆիան հեղուկ քրոմատագրության ձև է, որում մենք կարող ենք վերլուծել իոնային նյութերը: Հետևաբար, մերձավորության և իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիայի միջև հիմնական տարբերությունն այն է, որ մենք կարող ենք օգտագործել իոնափոխանակման քրոմատագրությունը միայն իոնային նյութերի բաժանման համար, մինչդեռ մերձավորության քրոմատոգրաֆիան ի վիճակի է առանձնացնել ինչպես լիցքավորված, այնպես էլ չլիցքավորված մասնիկները: Աշխատանքային սկզբունքը դիտարկելիս, կապակցվածության և իոնափոխանակման քրոմատագրության միջև տարբերությունն այն է, որ մերձեցման քրոմատոգրաֆիան ընթանում է այն պատճառով, որ թիրախային մոլեկուլները բարձր կապ ունեն անշարժ փուլի համար: Այնուամենայնիվ, իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիայի համար թիրախային մոլեկուլներն ունեն անշարժ ֆազային մակերևույթի լիցքի հակառակ լիցքը:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ներկայացնում է մերձեցման և իոնափոխանակման քրոմատագրության միջև տարբերությունը որպես կողք կողքի համեմատություն:
Ամփոփում – Affinity vs Ion Exchange Chromatography
Ամփոփելով, մերձավորությունը և իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիան հեղուկ քրոմատոգրաֆիական տեխնիկայի երկու ձև են: Հարազատության և իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիայի հիմնական տարբերությունն այն է, որ մենք կարող ենք օգտագործել մերձեցման քրոմատոգրաֆիա՝ լիցքավորված կամ չլիցքավորված բաղադրիչները խառնուրդում առանձնացնելու համար, մինչդեռ մենք կարող ենք օգտագործել իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիա՝ լիցքավորված բաղադրիչները խառնուրդում առանձնացնելու համար:
