Իմունոպրեցիպիտացիայի և համամիունային նստվածքի հիմնական տարբերությունն այն է, որ իմունային նստվածքը տեխնոլոգիա է, որը սպիտակուցը լուծույթից դուրս է հանում հատուկ հակամարմինների միջոցով, մինչդեռ համաիմունոպրեցիպտացիան տեխնիկա է, որը լուծույթից դուրս է բերում անձեռնմխելի սպիտակուցային համալիրներ՝ օգտագործելով հատուկ հակամարմին:
Հակագեն-հակամարմին փոխազդեցությունը հատուկ քիմիական փոխազդեցություն է B բջիջների կողմից արտադրվող հակամարմինների և անտիգենների (սպիտակուցների) միջև իմունային ռեակցիայի ժամանակ: Սովորաբար, լուծելի անտիգենները միանում են լուծելի հակամարմինների հետ էլեկտրոլիտի առկայության դեպքում լուծելի ջերմաստիճանում և pH-ում, որպեսզի ստեղծեն անլուծելի տեսանելի բարդույթ:Սա կոչվում է տեղումների ռեակցիա: Հետևաբար, իմունոպրեցիպտացիան և համամիունային նստվածքը տեղումների ռեակցիաների երկու տեսակ են, որոնք սովորաբար օգտագործվում են լաբորատորիաներում՝ նույնականացնելու սպիտակուցները, ինչպիսիք են անտիգենները:
Ի՞նչ է իմունային նստվածքը:
Իմունային նստվածքը լուծույթից սպիտակուցի նստեցման տեխնիկա է՝ հատուկ հակամարմինների միջոցով: Երբեմն այս տեխնիկան հայտնի է նաև որպես անհատական սպիտակուցային իմունային նստվածք: Իմունոպրեցիպտացիան օգտագործում է հակամարմին՝ բջիջների լիզատից հետաքրքրող ընտրված սպիտակուցը մեկուսացնելու համար: Հակամարմինը մաքրում է իր հատուկ թիրախային սպիտակուցը կամ հակագենը խառնուրդից: Հակամարմինը կապվում է սպիտակուցին, և հակամարմին-հակագին համալիրը դուրս է քաշվում նմուշից: Փորձարարական տեղադրման ժամանակ հակագեն-հակամարմին համալիրը դուրս է բերվում A/G սպիտակուցի զուգակցված ագարոզայի կամ մագնիսական ուլունքների միջոցով: Հետագայում ուլունքները լվանում են, և հետաքրքրող սպիտակուցը մաքրվում է: Մաքրված սպիտակուցը կամ անտիգենը, որը ստացվում է իմունային նստվածքով, ստուգվում է մի շարք մեթոդների միջոցով, ինչպիսիք են ֆերմենտային կապակցված իմունոսորբենտային վերլուծությունը (ELISA) և western blot (WB):
Գծապատկեր 01. Իմունային տեղումներ
Ավելին, մեկուսացված սպիտակուցները կամ անտիգենները կարող են քանակականացվել և նույնականացվել զանգվածային սպեկտրոմետրիայի միջոցով՝ օգտագործելով ֆերմենտային մարսողության օրինաչափությունները՝ հիմնված առաջնային հաջորդականության վրա: Որոշ նկատառումներ կան իմունային նստվածքների փորձարկումն սկսելուց առաջ՝ մեթոդի ձևաչափի ընտրություն, սպիտակուցների և ուլունքների կապում, ճիշտ առաջնային հակամարմինների և իզոտիպի ընտրություն և բացասական հսկողություն:
Ի՞նչ է համակցված տեղումներ:
Coimmunoprecipitation-ը լուծույթից անձեռնմխելի սպիտակուցային համալիրների նստեցման տեխնիկա է՝ հատուկ հակամարմինների միջոցով: Համաիմունային նստվածքն ընդհանուր առմամբ աշխատում է՝ ընտրելով հատուկ հակամարմին, որը թիրախավորում է հայտնի սպիտակուցը (հակագինը), որը համարվում է սպիտակուցների ավելի մեծ համալիրի անդամ:Հայտնի անդամին հատուկ հակամարմին թիրախավորելով՝ հնարավոր է ամբողջ սպիտակուցային համալիրը դուրս հանել լուծույթից: Սա հնարավորություն է տալիս նույնականացնել համալիրի անհայտ անդամներին: Սպիտակուցային կոմպլեքսները լուծույթից դուրս հանելու հայեցակարգը երբեմն անվանում են «քաշման» մեխանիզմ:
Գծապատկեր 02. B Համաիմունային տեղումներ
Coimmunoprecipitation-ը հզոր տեխնիկա է, որն օգտագործվում է սպիտակուց-սպիտակուց փոխազդեցության վերլուծության համար: Համաիմունային նստվածքի հիմնական նպատակը փոխազդող գործընկերների նույնականացումն է, ինչպիսիք են լիգանդները, կոֆակտորները կամ ազդարարող մոլեկուլները հետաքրքրող սպիտակուցին: Ավելին, կոիմունոպրեսիպտացիան արդյունավետ տեխնիկա է, որն օգտագործվում է սպիտակուցները շիճուկից, բջիջների լիզատից, համասեռ հյուսվածքից կամ պայմանական միջավայրից առանձնացնելու համար:
Որո՞նք են նմանությունները իմունոպրեցիպիտացիայի և համակցվածության միջև:
- Իմունոպրեցիպտացիան և համամիունային նստվածքը տեղումների ռեակցիայի վրա հիմնված տեխնիկայի երկու տեսակ են:
- Երկու տեխնիկան էլ կարող են օգտագործվել թիրախային հակագենը հատուկ հակամարմինների միջոցով նույնականացնելու համար:
- Երկու տեխնիկան էլ մեծապես կախված են հակագեն-հակամարմին փոխազդեցությունից:
- Դրանք սովորաբար օգտագործվում են կլինիկական լաբորատորիաներում:
Ո՞րն է տարբերությունը իմունային նստվածքների և համայնական տեղումների միջև:
Իմունոպրեցիպտացիան տեխնիկա է, որը լուծույթից սպիտակուցը նստեցնում է հատուկ հակամարմինների միջոցով, մինչդեռ համաիմունային նստվածքը տեխնիկա է, որը լուծույթից դուրս է բերում անձեռնմխելի սպիտակուցային համալիրներ՝ օգտագործելով հատուկ հակամարմին: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է իմունային նստվածքների և համակեցության միջև: Ավելին, իմունային նստվածքն ավելի հաճախ օգտագործվում է լաբորատորիաներում, մինչդեռ համակցվածությունը սովորաբար չի օգտագործվում լաբորատորիաներում:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ներկայացնում է իմունային տեղումների և համախառն տեղումների միջև տարբերությունները աղյուսակային տեսքով՝ կողք կողքի համեմատելու համար:
Ամփոփում – Իմունային տեղումներ ընդդեմ համակեղումներ
Իմունոպրեցիպիտացիան և համայնական նստվածքը տեղումների ռեակցիայի վրա հիմնված երկու տեսակի մեթոդներ են, որոնք կախված են հակագեն-հակամարմին փոխազդեցությունից: Իմունոպրեցիպիտացիայի տեխնիկան լուծույթից սպիտակուց է նստեցնում՝ օգտագործելով հատուկ հակամարմին, մինչդեռ համաիմունային նստվածքային տեխնիկան լուծույթից դուրս է բերում անձեռնմխելի սպիտակուցային համալիրներ՝ օգտագործելով հատուկ հակամարմին: Այսպիսով, սա ամփոփում է տարբերությունը իմունային նստվածքի և համայնական տեղումների միջև: