BCA-ի և Բրեդֆորդի վերլուծության հիմնական տարբերությունն այն է, որ BCA վերլուծությունը ժամանակատար է և պակաս ճշգրիտ, մինչդեռ Բրեդֆորդի վերլուծությունը արագ և ճշգրիտ է:
BCA և Բրեդֆորդի անալիզը սպիտակուցի կոնցենտրացիայի որոշման երկու մեթոդ է: Այս երկու անալիզներն ունեն վերլուծության տարբեր սկզբունքներ և տարբերություններ դրանց ճշգրտության մեջ:
Ի՞նչ է BCA Assay-ը:
BCA անալիզը կամ բիցինխոնինաթթվի անալիզը կենսաքիմիական անալիզ է, որն օգտակար է լուծույթում սպիտակուցի ընդհանուր կոնցենտրացիան որոշելու համար: Այս մեթոդը նաև անվանվել է որպես Սմիթի վերլուծություն՝ իր գյուտարար Փոլ Կ. Սմիթի պատվին: Այս վերլուծական մեթոդը ցույց է տալիս նմանություններ Lowry սպիտակուցի վերլուծության, Bradford սպիտակուցի վերլուծության կամ բիուրետային ռեագենտի հետ:Մենք կարող ենք դիտարկել ընդհանուր սպիտակուցի կոնցենտրացիան տվյալ նմուշում նմուշի լուծույթի գունային փոփոխության միջոցով, որը կանաչից դառնում է մանուշակագույն: Գույնի այս փոփոխությունը տեղի է ունենում սպիտակուցի պարունակության համամասնությամբ: Այնուհետև մենք կարող ենք օգտագործել գունաչափական տեխնիկա՝ վերլուծելու գույնի ինտենսիվությունը և սպիտակուցի պարունակությունը նմուշում:
BCA սպիտակուցի գնահատման մեթոդ
Երբ դիտարկվում է BCA հետազոտության մեխանիզմը, տիպիկ BCA լուծույթը պարունակում է բարձր ալկալային լուծույթ, որի pH-ը մոտ 11,25 է, և այս լուծույթի բաղադրիչները ներառում են բիցինխոնինաթթու, նատրիումի կարբոնատ, նատրիումի բիկարբոնատ, նատրիումի տարտրատ և պղնձի (II) սուլֆատ հնգահիդրատ. Այս վերլուծությունը հիմնականում կախված է երկու քիմիական ռեակցիաներից՝ պղնձի (II) պղնձի (I) վերացումը սպիտակուցում պեպտիդային կապերով և բիցինխոնինաթթվի երկու մոլեկուլների քելացում պղնձի (I) իոնով, ինչը հանգեցնում է մանուշակագույն գույնի բարդույթի, որը կարող է. կլանել լույսը 562 նմ ալիքի երկարությամբ: Առաջին ռեակցիայում պեպտիդային կապերով կրճատված պղնձի (II) քանակը համաչափ է նմուշի սպիտակուցի քանակին:
Ի՞նչ է Bradford Assay-ը:
Բրադֆորդի անալիզը սպեկտրոսկոպիկ անալիտիկ մեթոդ է, որն օգտակար է լուծույթում սպիտակուցի կոնցենտրացիան չափելու համար: Այս մեթոդը մշակվել է Մարիոն Մ. Բրեդֆորդի կողմից 1976 թվականին, և այն համեմատաբար արագ և ճշգրիտ մեթոդ է։
Սպիտակուցի և Բրեդֆորդի ռեագենտի գունային ռեակցիա
Մենք կարող ենք օգտագործել այս մեթոդը նմուշում սպիտակուցի քանակի կոնցենտրացիան որոշելու համար: Քիմիական ռեակցիան, որը տեղի է ունենում նմուշում այս վերլուծության ընթացքում, բացառապես կախված է նմուշի սպիտակուցի ամինաթթուների բաղադրությունից:
Սպիտակուցների գնահատման Բրադֆորդի մեթոդ
Այս հետազոտության մեթոդը դիտարկելիս այն սպիտակուցի գունաչափական վերլուծություն է, որը հիմնված է Coomassie Brilliant Blue G-250 անունով ներկի ներծծման փոփոխության վրա: Ընդհանուր առմամբ, այս ներկը գոյություն ունի երեք ձևերով՝ անիոնային (կապույտ), չեզոք (կանաչ) և կատիոնային (կարմիր): Հետեւաբար, թթվային պայմաններում ներկանյութը փոխում է իր գույնը կարմիրից կապույտ։ Դա պայմանավորված է սպիտակուցի կապով ներկանյութի հետ: Ի հակադրություն, եթե ներկի հետ կապող սպիտակուց չկա, գույնի փոփոխությունը չի երևում, լուծույթը ստանում է կարմիր-շագանակագույն երանգ։ Այս ներկը կարող է սպիտակուցի կարբոքսիլ խմբի հետ ձևավորել ամուր, ոչ կովալենտային բարդույթ՝ Վան դեր Վաալի ուժերի և էլեկտրաստատիկ ձգումների միջոցով:
Ո՞րն է տարբերությունը BCA-ի և Bradford Assay-ի միջև:
BCA և Բրեդֆորդի անալիզը սպիտակուցի կոնցենտրացիայի որոշման երկու մեթոդ է: Այս երկու անալիզներն ունեն վերլուծության տարբեր սկզբունքներ և դրանց ճշգրտության տարբերություններ: BCA-ի և Բրեդֆորդի վերլուծության հիմնական տարբերությունն այն է, որ BCA վերլուծությունը ժամանակատար է և պակաս ճշգրիտ, մինչդեռ Բրեդֆորդի վերլուծությունը արագ և ճշգրիտ է:
Հետևյալ ինֆոգրաֆիկան ամփոփում է BCA-ի և Բրեդֆորդի վերլուծության միջև եղած տարբերությունները աղյուսակային տեսքով:
Ամփոփում – BCA vs Bradford Assay
BCA անալիզը կամ բիցինխոնինաթթվի անալիզը կենսաքիմիական անալիզ է, որն օգտակար է լուծույթում սպիտակուցի ընդհանուր կոնցենտրացիան որոշելու համար: Բրեդֆորդի վերլուծությունը սպեկտրոսկոպիկ անալիտիկ մեթոդ է, որն օգտակար է լուծույթում սպիտակուցի կոնցենտրացիան չափելու համար: BCA-ի և Բրեդֆորդի վերլուծության հիմնական տարբերությունն այն է, որ BCA-ն ժամանակատար և պակաս ճշգրիտ է, մինչդեռ Բրեդֆորդի վերլուծությունը արագ և ճշգրիտ է:
