Բրեդֆորդի և ցածր սպիտակուցի փորձարկման հիմնական տարբերությունն այն է, որ Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը հիմնված է Coomassie փայլուն կապույտ G-250 ներկի կլանման տեղաշարժի վրա, մինչդեռ Lowry սպիտակուցի վերլուծությունը հիմնված է պղնձի իոնների (Cu+) իոնների ռեակցիայի վրա: արտադրվում է պեպտիդային կապերի օքսիդացումով Folin–Cioc alteu ռեագենտով։
Փորձարկումը վերլուծական տեխնիկա է, որն օգնում է բնութագրել նմուշի հիմնական ֆունկցիոնալ բաղադրիչները: Հետևաբար, վերլուծությունը կարող է լինել կամ որակական կամ քանակական թեստ: Շատ ոլորտներ, ներառյալ լաբորատոր բժշկությունը, դեղաբանությունը, շրջակա միջավայրի կենսաբանությունը, մոլեկուլային կենսաբանությունը, կենսաքիմիան և իմունոլոգիան, սովորաբար օգտագործում են այս տեսակի վերլուծությունները:Բրեդֆորդի և Լոուրիի սպիտակուցի վերլուծությունը երկու կենսաքիմիական անալիզներ են, որոնք որոշում են սպիտակուցի կոնցենտրացիան նմուշի լուծույթում: Երկու անալիզներն էլ օգտագործում են գունաչափական տեխնիկա՝ արդյունքներ ապահովելու համար:
Ի՞նչ է Bradford Protein Assay-ը:
Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը սպիտակուցի վերլուծության արագ սպեկտրոսկոպիկ անալիտիկ ընթացակարգ է: Այն ցույց է տալիս բարձր ճշգրտություն լուծույթում սպիտակուցի կոնցենտրացիան չափելիս: Մարիոն Բրեդֆորդը ներկայացրել է այս ընթացակարգը 1976թ.-ին: Այս վերլուծության մեջ ընդհանուր ռեակցիան հիմնված է չափված սպիտակուցների ամինաթթուների բաղադրության վրա: Այլ կերպ ասած, Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը գունաչափական վերլուծություն է: Այն օգտագործում է Coomassie փայլուն կապույտ ներկը: Հետևաբար, սպիտակուցի այս գունաչափական վերլուծությունը կախված է ներկանյութի կլանման տեղաշարժից: Coomassie brilliant blue G-250-ը գոյություն ունի երեք ձևաչափերով՝ կատիոնային (կարմիր), անիոնային (կապույտ) և չեզոք (կանաչ): Թթվային պայմաններում ներկանյութի կարմիր ձևը վերածվում է կապույտի։ Այն հաստատում է սպիտակուցի կապը։ Եթե սպիտակուցը չկա, լուծումը կարող է մնալ շագանակագույն:
Նկար 01. Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծություն
Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը տարբերվում է այլ սպիտակուցային վերլուծություններից, քանի որ այն ավելի քիչ ենթակա է սպիտակուցի լուծույթում առկա տարբեր քիմիական միացությունների միջամտություններին: Այս միացությունները ներառում են նատրիում, կալիում, գլյուկոզա և սախարոզա և այլն:
Ի՞նչ է Lowry Protein Assay-ը:
Lowry սպիտակուցի անալիզը կենսաքիմիական անալիզ է, որն օգտագործվում է լուծույթում սպիտակուցի ընդհանուր մակարդակը որոշելու համար: Oliver H. Lowry-ն այն մարդն է, ով մշակել է այս ռեագենտը 1940 թվականին: Ընթացակարգը պատկերում է լուծույթի սպիտակուցի ընդհանուր կոնցենտրացիան գույնի փոփոխությամբ, որը համաչափ է լուծույթում սպիտակուցի կոնցենտրացիան: Հետևաբար, սա նաև սպիտակուցի գունաչափական վերլուծություն է:
Պղնձի իոնների (Cu+) ռեակցիան, որն առաջանում է պեպտիդային կապերի օքսիդացման և Folin-Cioc alteu ռեագենտի միջև, այս ընթացակարգի հիմքն է:Բացի այդ, այս ռեագենտը պարունակում է ֆոսֆոմոլիբդաթթու և ֆոսֆոր-վոլֆսաթթու: Այնուամենայնիվ, Lowry սպիտակուցի վերլուծության ռեակցիայի մեխանիզմը լավ հասկանալի չէ: Բայց դա ներառում է ցիստեինի, տրիպտոֆանի և թիրոզինի մնացորդների օքսիդացում Ֆոլին-Ցիոկալտեու ռեագենտի կրճատման միջոցով:
Գծապատկեր 02. Lowry սպիտակուցի վերլուծություն
Ցիստեինի մնացորդները նպաստում են Lowry սպիտակուցի վերլուծության ժամանակ նկատված կլանմանը և ռեակցիայի արդյունքում ստացվում է փայլուն կապույտ մոլեկուլ; հետերոպոլիա մոլիբդենային կապույտ. Այս մոլեկուլի կրճատումը չափվում է ներծծմամբ 660 նմ: Հետևաբար, ցիստեինի և տրիպտոֆանի մնացորդների կոնցենտրացիան, որը նվազեցնում է Folin-Cioc alteu ռեագենտը, հանգեցնում է լուծույթում սպիտակուցի ընդհանուր կոնցենտրացիան:
Որո՞նք են նմանությունները Bradford-ի և Lowry Protein Assay-ի միջև:
- Բրեդֆորդի և Լոուրի պրոտեինի անալիզները որոշում են սպիտակուցի կոնցենտրացիան լուծույթում:
- Երկու մեթոդներն էլ գունաչափական մեթոդներ են։
- Նաև երկու մեթոդների զգայունությունը բարձր է։
Ո՞րն է տարբերությունը Bradford-ի և Lowry Protein Assay-ի միջև:
Bradford-ը և Lowry-ի պրոտեինի անալիզը երկու տեսակի թեստեր են, որոնք որոշում են սպիտակուցի կոնցենտրացիան լուծույթում: Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը հիմնված է Coomassie փայլուն կապույտ G-250 ներկի կլանման տեղաշարժի վրա, մինչդեռ Lowry սպիտակուցի վերլուծությունը կախված է պեպտիդային կապերի օքսիդացման արդյունքում առաջացած պղնձի իոնների ռեակցիայից՝ Folin-Cioc alteu ռեագենտով: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է Բրեդֆորդի և Լոուրի սպիտակուցի վերլուծության միջև: Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը տևում է 15 րոպե արդյունք ստանալու համար, մինչդեռ Lowery սպիտակուցի վերլուծությունը տևում է 40-60 րոպե արդյունք ստանալու համար: Այսպիսով, սա ևս մեկ տարբերություն է Բրեդֆորդի և Լոուրի սպիտակուցի փորձարկման միջև: Ավելին, Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը կախված է ամինաթթուների կազմից, մինչդեռ Lowry սպիտակուցի վերլուծությունը մասամբ կախված է ամինաթթուների կազմից:Հետևաբար, սա նաև տարբերություն է Բրեդֆորդի և Լոուրիի սպիտակուցի վերլուծության միջև:
Ստորև ինֆորաֆիկում ավելի շատ մանրամասներ են տրամադրվում Բրեդֆորդի և Լոուրի սպիտակուցի վերլուծության տարբերության վերաբերյալ:
Ամփոփում – Բրեդֆորդ ընդդեմ Լոուրի սպիտակուցի վերլուծություն
Փորձարկումը վերլուծական տեխնիկա է, որն օգտագործվում է նմուշի հիմնական ֆունկցիոնալ բաղադրիչը բնութագրելու համար: Բրեդֆորդի և Լոուրիի սպիտակուցի վերլուծությունը սպիտակուցի վերլուծության երկու տեսակ են, որոնք գործում են գունաչափական տեխնիկայի ներքո: Ե՛վ Բրեդֆորդի, և՛ Լոուրի սպիտակուցի վերլուծությունները որոշում են լուծույթում սպիտակուցի կոնցենտրացիան: Այնուամենայնիվ, Bradford-ի և Lowry Protein Assay-ի հիմնական տարբերությունը կայանում է նրանց կողմից օգտագործվող գունաչափական տեխնիկայի վրա: Բրեդֆորդի սպիտակուցի վերլուծությունը օգտագործում է Coomassie փայլուն կապույտ G-250, մինչդեռ Lowry սպիտակուցի վերլուծությունը օգտագործում է պղնձի իոններ (Cu+) իոններ և Folin-Cioc alteu ռեագենտ:Ավելին, Բրեդֆորդի մեթոդը արագ արդյունքներ է տալիս, քան Lowry սպիտակուցի վերլուծությունը: Այնուամենայնիվ, երկու մեթոդներն էլ շատ զգայուն մեթոդներ են և ենթակա են տարբեր նյութերի միջամտության:
