Լցման ափսեի և Spread ափսեի հիմնական տարբերությունն այն է, որ նմուշի հայտնի ծավալը տարածվում է ագարի միջավայրի մակերևույթի վրա տարածված ափսեի մեջ, մինչդեռ, թափման ափսեի մեջ, նմուշի հայտնի ծավալը խառնվում է. ագար, ապա լցնել ափսեի մեջ: Այս երկու տեխնիկայի ճշգրտությունը համեմատելիս, լցնել ափսեը ավելի բարձր ճշգրտություն ունի, քան փռված ափսեը:
Ստանդարտ թիթեղների հաշվարկման մեթոդը աճի վրա հիմնված մոտեցում է, որը հաշվում է կենդանի (աճող/մշակելի/կենսունակ) միկրոօրգանիզմների թիվը նմուշում: Սա հզոր մեթոդ է, որն օգտագործվում է բազմաթիվ մանրէաբանական ոլորտներում կենդանի միկրոօրգանիզմների քանակը վերլուծելու համար:Այն ոլորտները, ինչպիսիք են սննդամթերքը և կաթնամթերքը, բժշկական, բնապահպանական, ջրային և գյուղատնտեսական, մանրէների գենետիկան, մոլեկուլային մանրէաբանությունը, աճի միջավայրի զարգացումը և կենսատեխնոլոգիան (բիոռեակտորային տեխնոլոգիա, խմորում, թափոնների/կեղտաջրերի մաքրում և այլն) օգտագործում են այս տեխնիկան: Ավելին, ստանդարտ ափսեի հաշվարկն իրականացնելու երկու հիմնական եղանակ կա. դրանք են՝ «Spread plate» և «Pour plate» տեխնիկան:
Ի՞նչ է Pour Plate?
Pour plate տեխնիկան մանրէաբանական մեթոդ է նմուշում առկա որոշ կենսունակ բջիջների թվարկման համար: Լցնել ափսեի մեթոդի առանձնահատկությունն այն է, որ նմուշի հայտնի ծավալը սկզբում խառնվում է ագարի հետ, այնուհետև լցնում ափսեի մեջ:
Նկար 01. Լցնել ափսե
Մյուս քայլերը նման են հաջորդ բաժնում քննարկված փռված ափսեի տեխնիկային:Նմուշի հետ խառնված ագարը լցնելուց հետո հաջորդ քայլը թույլ տալն է, որ այն կարծրանա և ինկուբացվի: Ինկուբացիայից հետո կենսունակ գաղութների քանակը հաշվելը կարևոր է 1 գ կամ 1 մլ-ի վերջնական CFU-ն հաշվարկելու համար:
Ի՞նչ է Spread Plate?
Spread plate-ը նմուշում կենսունակ բջիջները թվարկելու տեխնիկա է: Այս տեխնիկայի համար նմուշի համար անհրաժեշտ է սերիական նոսրացում՝ ապահովելու համար, որ առնվազն մեկը առաջացնի հաշվելի թվով գաղութներ: Գործընթացն այստեղ ագարի ափսեի մակերևույթի վրա նոսրացման որոշակի ծավալի խողովակներ դնելն է և այն արագ և հավասարաչափ տարածել ագարի մակերեսի վրա ապակե ցրիչով, որը սպիրտի կրակի վրա և սառեցվել է: Կրկնօրինակումների կատարումը անհրաժեշտ է հուսալի միջին արժեք ստանալու համար: Հաջորդ քայլը այս թիթեղները կարճ ժամանակով չորացնելն է, այնուհետև շրջել և դնել ինկուբատորում՝ աճի համար հարմար ջերմաստիճանի և սահմանված ինկուբացիոն շրջանի համար:
Նկար 02. Տարածված ափսե
Ինկուբացիայից հետո թիթեղների ուսումնասիրությունը ցույց կտա աճը։ Մեկ կամ մի քանի նոսրացումների դեպքում պատվաստանյութերում առկա բջիջների քանակը (օրինակ՝ 100 կամ 200 մկլ) կառաջացնի ագարի մակերեսի վրա 30-ից 300 առանձին գաղութներ: 30-ից պակաս գաղութների հաշվարկները վիճակագրորեն անհուսալի են: 300-ից բարձր թվերը դժվար է թվարկել և հակված են սխալների:
Որո՞նք են նմանությունները ափսեի և ափսեի միջև:
- Spread plate և pour plate-ը երկու մեթոդներ են նմուշում առկա կենսունակ բջիջների քանակի ստացման համար:
- Երկուսն էլ ուղիղ մեթոդներ են։
- Նմուշառման սխալները կարող են տեղի ունենալ երկու եղանակով էլ:
- Աճի պայմանների սահմանափակումները ազդում են երկու մեթոդների արդյունքի վրա:
- Տեխնիկական սխալները նույնպես կարող են խանգարել երկու մեթոդների վերջնական արդյունքին:
- Չնայած կենսունակ են, սակայն այս երկու մեթոդները չեն օգտագործվում անմշակ բակտերիաներ աճեցնելու համար:
Ո՞րն է տարբերությունը ափսեի և ափսեի միջև:
Pour plate-ը մանրէաբանական տեխնիկա է նմուշում մի շարք կենսունակ բջիջների թվարկման համար: Տարածված ափսեի տեխնիկան կրիչի մակերեսին աճեցված բակտերիաները թվարկելու ևս մեկ տեխնիկա է: Լցնել ափսեի տեխնիկայում, գործընթացը կայանում է նրանում, որ նմուշը լցնել ափսեի վրա ամրացված միջին մակերեսի վրա: Բայց, spred ափսեի տեխնիկայի մեջ, գործընթացն այն է, որ նմուշը խառնվի հալած ագարի հետ և այն լցնել ափսեի մեջ:
Ինչ վերաբերում է այս երկու տեխնիկայի ճշգրտությանը, ապա լցնել ափսեը ավելի բարձր ճշգրտություն ունի, քան փռված ափսեը: Ավելին, ի տարբերություն հորդառատ ափսեի, ապակու տարածիչն օգտագործվում է ափսեի վրա նմուշը մակերեսի վրա հավասարաչափ տարածելու համար: Այնուհետև, օգտագործելով հորդառատ ափսե, կարելի է թվարկել աերոբները, անաէրոբները և ֆակուլտատիվ անաէրոբները: Այնուամենայնիվ, օգտագործելով փռված թիթեղը հնարավոր է միայն թվարկել աերոբները:Ավելին, կարծրացված ագարի թիթեղները անհրաժեշտ են սփռված ափսեի իրականացման համար, մինչդեռ հեղուկ հալած ագարի միջավայրերը անհրաժեշտ են թափելու մեթոդի համար:
Ամփոփում – Pour Plate vs Spread Plate
Pour plate-ը և Spread plate-ը մանրէաբանության մեջ երկու տեխնիկա են, որոնք հեշտացնում են մանրէաբանական բջիջների թվարկումը նմուշում: Երկու մեթոդներն էլ հիմնված են աճի վրա, հետևաբար, չափեք կենսունակ բջիջները: Լցնել ափսեի ընթացքում նմուշի հայտնի ծավալը խառնվում է հալած ագարի հետ և լցնում ափսեի մեջ: Սփռված ափսեի ընթացքում հայտնի ծավալը տարածվում է ամրացված ագարի միջավայրի մակերեսին: Սա է տարբերությունը լցնել ափսեի և ափսեի միջև:
