Հիմնական տարբերություն – Գել կուտակող ընդդեմ առանձնացնող գել
Ստեկինգ գել և տարանջատող գել տերմիններն օգտագործվում են SDS-PAGE տեխնիկան բացատրելու համար: SDS-PAGE կամ նատրիումի դոդեցիլ սուլֆատ-պոլիակրիլամիդ գելային էլեկտրոֆորեզը լաբորատոր տեխնիկա է, որն օգտագործվում է սպիտակուցի մոլեկուլները բաժանելու համար՝ հիմնվելով դրանց մոլեկուլային քաշի վրա: Տեխնիկայի հիմքում ընկած տեսությունն այն է, որ տարբեր մոլեկուլային քաշ ունեցող սպիտակուցները ցույց են տալիս միգրացիայի տարբեր տեմպեր. ցածր մոլեկուլային քաշի մոլեկուլներն ավելի արագ են գաղթում, մինչդեռ բարձր մոլեկուլային մոլեկուլները դանդաղ են գաղթում: Միգրացիայի միջոցը գելն է: Գոյություն ունեն գելերի երկու տեսակ, որոնք կոչվում են շարվող գել և բաժանող գել:Դրսևորող գելի և բաժանարար գելի հիմնական տարբերությունն այն է, որ գելի pH-ը 6,8 է, մինչդեռ բաժանարար գելի pH-ը 8,8 է:
Ի՞նչ է Stacking Gel?
Stacking gel-ը ցածր խտացված պոլիակրիլամիդային գել է, որը տեղադրվում է SDS-PAGE տեխնիկայով ավելի խտացված լուծող գելի (տարանջատող գելի) վերևում: Stacking գելը օգտագործվում է էլեկտրոֆորեզի լուծումը բարելավելու համար: Բանաձևը մեծանում է, քանի որ լուծվող գելի և լուծվող գելի կոնցենտրացիաների տարբերությունը ազդում է նմուշի սպիտակուցների վրա: Քանի որ պոլիակրիլամիդի կոնցենտրացիան ցցվող գելում ցածր է, ծակոտիների չափն ավելի մեծ է: Սա նաև օգնում է մեծացնել բաժանումը։
Դարսավորող գելը չամրացված պոլիակրիլամիդային գել է՝ մոտ 7% պոլիակրիլամիդից մեծ ծակոտիներով: Այս ծակոտիները չեն գործում որպես զգալի խոչընդոտ մեծ սպիտակուցային մոլեկուլների համար: Հետևաբար, այս գելը մի փոքր ազդում է այդ սպիտակուցների շարժունակության վրա: Սա բաժանում է սպիտակուցի շարժունակության և չափի համաձայն՝ դրանք կենտրոնացնելով երկու գելերի միջև:
Նկար 01. SDS-PAGE Ակրիլամիդ Գել
Դարսավորող գելի pH-ը 6,8 է: Դրա pH-ը թթվային է, քան գելը 2 pH միավորով լուծվող: Այս pH-ը ենթադրում է ավելի ցածր իոնային ուժ, հետևաբար ավելի բարձր էլեկտրական դիմադրություն: Սա հրահրում է սպիտակուցների շարժունակությունը, քան գելում առկա այլ լիցքավորված մասնիկները:
Ի՞նչ է առանձնացնող գելը
SDS-PAGEtechnique-ի տարանջատող գելը կամ լուծող գելը բարձր խտացված պոլիակրիլամիդային գել է, որը տեղադրվում է ցածր խտությամբ շերտավորող գելի վերևում: Տարանջատող գելը պարունակում է մեծ քանակությամբ պոլիակրիլամիդ (10%): Այս գելի pH-ը պահպանվում է որպես pH=8,8, ինչը pH-ի մակարդակից բարձր է, քան շարվող գելի մակարդակը:
Նկար 02. Գելային էլեկտրոֆորեզի սարք
Երբ սպիտակուցի մոլեկուլները հասնում են տարանջատող գելին, այդ մոլեկուլների միգրացիան դանդաղում է, քանի որ առանձնացնող գելը բարձր կոնցենտրացիայի գել է՝ փոքր ծակոտի չափով, որը կարող է զգալի խոչընդոտ հանդիսանալ սպիտակուցի մոլեկուլների շարժման համար։. Այս դանդաղեցումը թույլ է տալիս, որ մյուս սպիտակուցները դանդաղորեն գաղթում են, որպեսզի հասնեն իրենց, ինչը հանգեցնում է նեղ, կենտրոնացված գոտի երկու գելերի միջև:
Ինչպիսի՞ն է փոխհարաբերությունը գել դնելու և տարանջատող գելի միջև:
Եվ Stacking Gel և Separating Gel տեսակները օգտագործվում են նույն ապարատում:
Ո՞րն է տարբերությունը շերտավորող գելի և տարանջատող գելի միջև:
Դարսավորող գել ընդդեմ առանձնացնող գել |
|
| Stacking gel-ը ցածր խտությամբ պոլիակրիլամիդ գել է, որը տեղադրվում է ավելի խտացված լուծող գելի (տարանջատող գելի) վերևում՝ SDS-PAGE տեխնիկայով: | SDS-PAGE տեխնիկայի տարանջատող գելը կամ լուծող գելը բարձր խտացված պոլիակրիլամիդային գել է, որը տեղադրվում է ցածր խտությամբ կուտակվող գելի վերևում: |
| Տեղաբաշխում | |
| Տարածող գելը դրվում է լուծող (բաժանող) գելի վրա։ | Առանձնացնող գելը դրվում է գելային էլեկտրոֆորեզի համար օգտագործվող տարայի հատակին: |
| Համակենտրոնացում | |
| Դարսավորող գելի կոնցենտրացիան բարձր է։ | բաժանող գելի կոնցենտրացիան ցածր է։ |
| պոլիակրիլամիդի պարունակություն | |
| Ստաքինգ գելը պարունակում է մոտ 7% պոլիակրիլամիդ: | Առանձնացնող գելը պարունակում է մոտ 10% պոլիակրիլամիդ: |
| pH | |
| Դարսավորող գելի pH-ը 6,8 է: | Բաժանող գելի pH-ը 8,8 է: |
| Ծակոտիների չափ | |
| Խոշոր ծակոտիները առկա են stacking gel-ում: | Փոքր ծակոտիները առկա են առանձնացնող գելում: |
| Բանաձև | |
| Ստեկ գելը ավելի լավ լուծում է տալիս: | Առանձնացնող գելը թույլ լուծում է տալիս։ |
Ամփոփում – Խցանող գել ընդդեմ առանձնացնող գել
Տարադրող գելը և տարանջատող գելը պոլիակրիլամիդ գելերի երկու տեսակ են, որոնք օգտագործվում են տվյալ նմուշում սպիտակուցի մոլեկուլների ավելի լավ տարանջատման համար:Դրսևորող գելի և բաժանարար գելի միջև տարբերությունն այն է, որ գելի pH-ը 6,8 է, մինչդեռ բաժանարար գելի pH-ը 8,8 է:
