ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման հիմնական տարբերությունն այն է, որ ԴՆԹ-ի մեկուսացումը ընթացակարգ է, որտեղ նուկլեինաթթվի մի տեսակ, որը կոչվում է ԴՆԹ, արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից, մինչդեռ ՌՆԹ-ի մեկուսացումը ընթացակարգ է, որտեղ նուկլեինաթթվի մի տեսակ կոչվում է ՌՆԹ: արդյունահանված կենսաբանական բջիջից։
Նուկլեինաթթվի մեկուսացումը մեկնարկային կետն է ներքևում գտնվող կիրառությունների հսկայական շարքում: Սկզբնական նմուշներում նուկլեինաթթուների բարձր որակը հիմնական գործոնն է հետագա ներքևում գտնվող կիրառությունների հաջողության համար: Նուկլեինաթթվի մեկուսացումը կարող է սահմանվել որպես մի շարք քայլեր՝ մաքրության նմուշում նուկլեինաթթու ստանալու համար, որը կարող է օգտագործվել ներքևի կիրառման տարբեր քայլերի համար:Նուկլեինաթթվի արդյունահանման նպատակն է քայքայել բջջային թաղանթը և հասնել լիպիդների և սպիտակուցների առավելագույն վերացմանը՝ մաքուր նուկլեինաթթուներ ստանալու համար, ինչպիսիք են ԴՆԹ-ն կամ ՌՆԹ-ն:
Ի՞նչ է ԴՆԹ-ի մեկուսացումը:
ԴՆԹ-ի մեկուսացումը սովորական պրոցեդուրա է, որտեղ նուկլեինաթթվի մի տեսակ, որը կոչվում է ԴՆԹ, դուրս է բերվում կենսաբանական բջիջից: ԴՆԹ-ի մեկուսացումն իրականացվում է արյունից, սառեցված հյուսվածքի նմուշներից և պարաֆինային հյուսվածքների բլոկներից ԴՆԹ-ի արդյունահանմամբ: ԴՆԹ-ի մեկուսացման երեք հիմնական փուլ կա՝ ներառյալ բջիջների լիզումը, ԴՆԹ-ի արդյունահանումը և տեղումների քանակը: Բջիջների լիզման ժամանակ նմուշի բջիջները հաճախ առանձնացվում են միմյանցից ֆիզիկական միջոցներով, ինչպիսիք են մանրացումը կամ պտտումը և դրվում աղ պարունակող լուծույթի մեջ: Սովորաբար, աղի մեջ պարունակվող դրական լիցքավորված նատրիումի իոններն օգնում են պաշտպանել բացասական լիցքավորված ֆոսֆատային խմբերը, որոնք անցնում են ԴՆԹ-ի ողնաշարի երկայնքով: Հետագայում ավելացվում է լվացող միջոց՝ բջջաթաղանթի և միջուկների լիպիդները քայքայելու համար, որոնք արձակում են ԴՆԹ, քանի որ այդ թաղանթները խաթարվում են։
Նկար 01. ԴՆԹ-ի մեկուսացում
ԴՆԹ-ի արդյունահանումն իրականացվում է ԴՆԹ-ի մաքուր նմուշ ստանալու համար: Հաճախ, պրոթեզերոնի ֆերմենտը ավելացվում է ԴՆԹ-ի հետ կապված սպիտակուցների և այլ բջջային սպիտակուցների քայքայման համար: Ավելին, բջջային բեկորների մի մասը կարելի է հեռացնել՝ զտելով նմուշը: Ի վերջո, ԴՆԹ-ն նստվածք է ստանում ալկոհոլի օգտագործմամբ: Ավելին, եթե շատ ԴՆԹ կա, ապա պրոցեդուրաների վերջում կարելի է նկատել ժլատ սպիտակ նստվածք։
Ի՞նչ է ՌՆԹ-ի մեկուսացումը:
ՌՆԹ-ի մեկուսացումը ընթացակարգ է, որտեղ նուկլեինաթթվի մի տեսակ, որը կոչվում է ՌՆԹ, արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից: Այս պրոցեդուրան հաճախ բարդանում է բջիջներում և հյուսվածքներում ռիբոնուկլեազային ֆերմենտների առկայությամբ, որոնք քայքայում են ՌՆԹ-ն: Նմուշներից ՌՆԹ-ն առանձնացնելու համար մոլեկուլային կենսաբանության մեջ օգտագործվում են մի քանի մեթոդներ, ինչպիսիք են գուանիդինիում-թիոցիանատ-ֆենոլ-քլորոֆորմի արդյունահանումը:
Նկար 02. ՌՆԹ-ի մեկուսացում
ՌՆԹ-ի մեկուսացումը սովորաբար բաղկացած է մի քանի քայլերից, ներառյալ բջիջների լիզումը և համասեռացումը, կենսաքիմիական գործընթացների մարումը, նուկլեինաթթվի բաժանումը, ՌՆԹ-ի որոնումը, կոպիտ մաքրումը և ՌՆԹ-ի որակի գնահատումը: Զտիչ թղթի վրա հիմնված լիզի և լուծույթի մեթոդը ՌՆԹ-ի արդյունահանման մեջ ունի բարձր թողունակություն: Ավելին, ՌՆԹ-ի արդյունահանումը հեղուկ ազոտի միջոցով՝ օգտագործելով շաղախ և մուրճ, նույնպես շատ օգտակար մեթոդ է, քանի որ այն կանխում է ռիբոնուկլեազի ակտիվությունը:
Որո՞նք են նմանությունները ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման միջև:
- ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացումը նուկլեինաթթվի մեկուսացման երկու տեսակի ընթացակարգեր են:
- Երկու պրոցեդուրաներն ունեն նմանատիպ հիմնական քայլեր, ինչպիսիք են բջիջների լիզումը, արդյունահանումը և մաքրումը:
- Այս ընթացակարգերը մեկուսացնում են նուկլեինաթթուների կարևոր տեսակները, որոնք ունեն մի շարք ներքևի կիրառումներ:
- Դրանք իրականացվում են լաբորատոր պայմաններում:
- Դրանք կարող են իրականացվել արտադրված հավաքածուների միջոցով:
Ո՞րն է տարբերությունը ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման միջև:
ԴՆԹ-ի մեկուսացման ժամանակ նուկլեինաթթվի մի տեսակ, որը կոչվում է ԴՆԹ, արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից, մինչդեռ ՌՆԹ-ի մեկուսացման դեպքում նուկլեինաթթվի մի տեսակ, որը կոչվում է ՌՆԹ, արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից: Այսպիսով, սա ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման հիմնական տարբերությունն է: Ավելին, ԴՆԹ-ի մեկուսացումը սովորաբար իրականացվում է pH 7-ից 8-ի սահմաններում, մինչդեռ ՌՆԹ-ի մեկուսացումը սովորաբար իրականացվում է մոտ pH 4,5-ում:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ներկայացնում է ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման տարբերությունները աղյուսակային տեսքով՝ կողք կողքի համեմատելու համար:
Ամփոփում – ԴՆԹ-ն ընդդեմ ՌՆԹ-ի մեկուսացման
ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացումը նուկլեինաթթվի մեկուսացման երկու տեսակի ընթացակարգեր են:ԴՆԹ-ի մեկուսացումը ընթացակարգ է, որի ընթացքում ԴՆԹ-ն արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից: ՌՆԹ-ի մեկուսացումը ընթացակարգ է, որի ընթացքում ՌՆԹ-ն արդյունահանվում է կենսաբանական բջիջից: Այսպիսով, սա է ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մեկուսացման հիմնական տարբերությունը:
