Հակադարձ փուլի և նորմալ փուլի HPLC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ հակադարձ փուլային HPLC-ն օգտագործում է ոչ բևեռային ստացիոնար փուլ և բևեռային շարժական փուլ, մինչդեռ նորմալ փուլային HPLC-ն օգտագործում է բևեռային ստացիոնար և պակաս բևեռային շարժական փուլ:
Նորմալ փուլային HPLC-ն HPLC-ի ամենահին տեխնիկան է, որը Tswett-ն օգտագործել է բույսերի էքստրակտների իր տարանջատման ժամանակ; նա օգտագործել է կավիճ ապակե սյունակում: Սա քրոմատոգրաֆիայի դասական եղանակն էր, որը հանգեցրեց այն անվանելու «նորմալ» տեխնիկա: Մյուս կողմից, հակադարձ փուլով HPLC-ն սովորական տեխնիկայի հակառակն է, որը գիտնականները մշակել են վերջերս:
Ի՞նչ է հակադարձ փուլային HPLC-ն:
Հակադարձ փուլ HPLC-ն քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա է, որտեղ մենք օգտագործում ենք հիդրոֆոբ ստացիոնար փուլ: Բոլոր HPLC մեթոդների մեջ մենք օգտագործում ենք այս մեթոդը մոտավորապես 70%-ով, քանի որ դրա լայն կիրառելիությունը և վերարտադրելիությունը: Ստացիոնար փուլը ոչ բևեռ է, իսկ շարժական փուլը՝ բևեռային։
Շատ դեպքերում գիտնականները որպես շարժական փուլ օգտագործում են ջրի ջրային խառնուրդ խառնվող, բևեռային օրգանական լուծիչով, ինչպիսիք են ացետոնիտրիլը կամ մեթանոլը: Հետևաբար, անալիտները փոխազդում են ոչ բևեռային ստացիոնար փուլի հետ:
Ի՞նչ է նորմալ փուլային HPLC-ն:
Նորմալ փուլ HPLC-ն քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա է, որտեղ մենք օգտագործում ենք հիդրոֆիլ ստացիոնար փուլ: Դա HPLC-ի ավանդական մեթոդն է, թեև մենք այն այդքան էլ չենք օգտագործում: Ստացիոնար փուլը բևեռային է, իսկ շարժական փուլը՝ ոչ բևեռային։ Ավելի կարևոր է, որ այս տեխնիկայի շարժական փուլը 100% օրգանական է: Դա նշանակում է, որ դրա համար ջուր չի օգտագործվում։
Նկար 01. Նորմալ փուլային և հակադարձ փուլային HPLC քրոմատոգրամների նմուշային պրոֆիլ՝ ըստ անալիտի բաղադրիչների բևեռականության:
Սովորաբար, ստացիոնար փուլը պարունակում է սիլիցիումի, ցիանո, դիոլ, ամինային կապակցված փուլեր և այլն: Շարժական փուլերը ներառում են օրգանական լուծիչներ, ինչպիսիք են հեքանը, էթիլացետատը և այլն: Այս տեխնիկան հիմնված է լուծիչի կամ անալիտի մոլեկուլների պահպանման վրա: բևեռային ստացիոնար փուլ։
Ո՞րն է տարբերությունը հակադարձ փուլի և նորմալ փուլի HPLC-ի միջև:
Հակադարձ փուլ HPLC-ն քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա է, որտեղ մենք օգտագործում ենք հիդրոֆոբ ստացիոնար փուլ: Այս տեխնիկայի անշարժ փուլը ոչ բևեռ է, մինչդեռ շարժական փուլը բևեռային է: Ավելին, գիտնականներն օգտագործում են ջրի ջրային խառնուրդ խառնվող, բևեռային օրգանական լուծիչով, ինչպիսիք են ացետոնիտրիլը կամ մեթանոլը, որպես հակադարձ փուլային HPLC-ի շարժական փուլ:Ի հակադրություն, նորմալ փուլ HPLC-ն քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա է, որտեղ մենք օգտագործում ենք հիդրոֆիլ ստացիոնար փուլ: Այս տեխնիկայի անշարժ փուլը բևեռային է, մինչդեռ շարժական փուլը ոչ բևեռ է: Բացի այդ, գիտնականներն օգտագործում են օրգանական լուծիչներ, ինչպիսիք են հեքանը, էթիլացետատը և այլն, որպես նորմալ փուլային HPLC-ի շարժական փուլ: Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ներկայացնում է հակադարձ փուլի և նորմալ փուլի HPLC-ի տարբերությունը աղյուսակային տեսքով:
Ամփոփում – Հակադարձ փուլ ընդդեմ նորմալ փուլի HPLC
Հակադարձ փուլային և նորմալ փուլային HPLC տեխնիկան հեղուկ քրոմատագրման երկու տեխնիկա է: Հակադարձ փուլի և նորմալ փուլի HPLC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ հակադարձ փուլային HPLC-ն օգտագործում է ոչ բևեռային կայուն փուլ և բևեռային շարժական փուլ, մինչդեռ նորմալ փուլային HPLC-ն օգտագործում է բևեռային ստացիոնար փուլ և ավելի քիչ բևեռային շարժական փուլ:
