Հիմնական տարբերություն – Նիտրոցելյուլոզ ընդդեմ նեյլոնե թաղանթի
Բլոտը կարևոր տեխնիկա է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ դրանց խառնուրդներից ԴՆԹ-ի, ՌՆԹ-ի և սպիտակուցների հատուկ հաջորդականությունների հայտնաբերման համար: Այն կատարվում է բլոտ կոչվող թաղանթի միջոցով: Գոյություն ունեն բլոթի տարբեր մեթոդներ, ինչպիսիք են հյուսիսային, հարավային և արևմտյան բլոտինգը: Բլոտման գործընթացի համար պատշաճ թաղանթ ընտրելը պետք է զգույշ արվի՝ կանխելու ոչ հատուկ կապակցման և սխալ հայտնաբերումները: Նիտրոցելյուլոզը, նեյլոնը և PVDF-ը սովորաբար օգտագործվում են թաղանթներ բլոտման տեխնիկայում: Նրանք ունեն տարբեր բնութագրեր. Նիտրոցելյուլոզայի և նեյլոնե թաղանթի հիմնական տարբերությունն այն է, որ նիտրոցելյուլոզային մեմբրաններն ունեն սպիտակուցի անշարժացման բարձր ներուժ, մինչդեռ նեյլոնե մեմբրաններն ունեն բարձր նուկլեինաթթվի անշարժացման ներուժ:Այնուամենայնիվ, թաղանթների երկու տեսակներն էլ հաճախ օգտագործվում են բլոթի տեխնիկայի մեջ:
Ի՞նչ է նիտրոցելյուլոզային թաղանթը:
Նիտրոցելյուլոզային թաղանթը նուկլեինաթթուների և սպիտակուցների բլոտավորման տեխնիկայում սովորաբար օգտագործվող թաղանթային զտիչ է: Այն ունի բարձր սպիտակուցային կապի ներուժ: Հետևաբար, նիտրոցելյուլոզային թաղանթները լայնորեն օգտագործվում են western blotting տեխնիկայում: Նիտրոցելյուլոզային թաղանթները համատեղելի են հիբրիդացման բոլոր մեթոդների հետ և ցույց են տալիս բարձր կապող կարողություններ՝ առանց միջամտությունների: Նիտրոցելյուլոզային թաղանթները բնական հիդրոֆիլ բնույթ ունեն: Նրանք հիդրոֆիլ փոխազդեցություն են իրականացնում մոլեկուլների հետ և արդյունավետորեն անշարժացնում դրանք թաղանթի վրա: Առևտրային նիտրոցելյուլոզային թաղանթները հասանելի են երկու ծակոտի չափերով՝ 0,45 և 0,2 մկմ։
Նկար 01. Նիտրոցելյուլոզային թաղանթ, որն օգտագործվում է Western blotting-ում
Ի՞նչ է նեյլոնե թաղանթը:
Նեյլոնե թաղանթը առևտրային թաղանթների մեկ այլ տեսակ է, որն օգտագործվում է բլոթի տեխնիկայում: Այն այլընտրանքային կերպով օգտագործվում է նիտրոցելյուլոզային թաղանթների հետ հարավային և հյուսիսային բլոթի համար: Նեյլոնե թաղանթները իդեալական են հարավային բլոթի համար, քան նիտրոցելյուլոզը՝ ԴՆԹ-ի հետ կապվելու իրենց բարձր կապակցությամբ: Նեյլոնե թաղանթների մի քանի եզակի առանձնահատկությունների պատճառով հետազոտողները սովորաբար օգտագործում են նեյլոնե թաղանթներ հարավային և հյուսիսային բլոտման համար՝ նիտրոցելյուլոզային թաղանթի փոխարեն: Նեյլոնե թաղանթները նույնպես խորհուրդ են տրվում մերկացնելու և վերազտելու համար՝ ի տարբերություն նիտրոցելյուլոզայի:
Գծապատկեր 02. Նեյլոնե թաղանթ, որն օգտագործվում է հարավային բլոթի համար
Ո՞րն է տարբերությունը նիտրոցելյուլոզայի և նեյլոնե թաղանթի միջև:
Նիտրոցելյուլոզ ընդդեմ նեյլոնե թաղանթի |
|
| Նիտրոցելյուլոզային թաղանթները փխրուն են: | Նեյլոնե թաղանթները ավելի քիչ փխրուն են: |
| Բեռնաթափում | |
| Դժվար է կառավարել դրանք: | Դրանք հեշտ է վարվել: |
| Վերազննում | |
| Չաջակցվող նիտրոցելյուլոզային թաղանթները դժվար է նորից հետազոտել: | Նեյլոնե թաղանթներով վերազոնավորումը հեշտ է: |
| Համատեղելիություն պահպանման տարբեր պայմանների հետ | |
| Նիտրոցելյուլոզային թաղանթները ավելի քիչ ուժ ունեն պահեստավորման տարբեր պայմաններին դիմակայելու համար: | Նեյլոնե թաղանթները ավելի ամուր են արձագանքում պահպանման տարբեր պայմաններին: |
| Օգտագործել | |
| Պահանջվում է կանխավճար: | Նեյլոնե թաղանթների համար նախնական թրջումը չի պահանջվում: |
| Հիդրոֆիլ բնություն | |
| Նիտրոցելյուլոզային թաղանթներն իրենց բնույթով հիդրոֆիլ են, բայց ավելի քիչ հիդրոֆիլ են, քան նեյլոնե թաղանթները: | Նրանք ունեն բարձր հիդրոֆիլ բնույթ։ |
| Անշարժացման ներուժ | |
| Նիտրոցելյուլոզային թաղանթները ավելի քիչ կապ ունեն նուկլեինաթթուների նկատմամբ: Բայց այն ունի բարձր հարաբերակցություն սպիտակուցների նկատմամբ։ | Նեյլոնե թաղանթները նուկլեինաթթուների հետ կապելու բարձր պոտենցիալ ունեն, քան նիտրոցելյուլոզային թաղանթները: |
Ամփոփում – Նիտրոցելյուլոզ ընդդեմ նեյլոնե թաղանթի
Նիտրոցելյուլոզային և նեյլոնե թաղանթները հատուկ թաղանթներ են, որոնք օգտագործվում են բլոտինգի տեխնիկայում՝ գելի վրա կապող նախշը վերարտադրելու համար:Դրանք թույլ են տալիս խառնուրդներից որոշակի հաջորդականություն կամ սպիտակուց հայտնաբերելու հնարավորություն՝ դրանք թաղանթի վրա անշարժացնելով։ Երբ մոլեկուլները անշարժանում են թաղանթի վրա, այն կարող է օգտագործվել որպես հիբրիդացման վերլուծության հիմք՝ պիտակավորված զոնդերով: Նիտրոցելյուլոզային թաղանթը սովորաբար օգտագործվում է սպիտակուցի հայտնաբերման համար Western blotting տեխնիկայում՝ սպիտակուցների հետ իր բարձր կապակցման պատճառով: Նեյլոնե թաղանթները հաճախ օգտագործվում են հարավային և հյուսիսային բլոթի համար: Սա է տարբերությունը նիտրոցելյուլոզայի և նեյլոնե թաղանթի միջև:
