Կլոնավորման վեկտորի և էքսպրեսիայի վեկտորի հիմնական տարբերությունն այն է, որ կլոնավորման վեկտորը տանում է օտար ԴՆԹ-ի բեկորը հյուրընկալող բջիջ, մինչդեռ էքսպրեսիվ վեկտորը հեշտացնում է գեների արտահայտումը սպիտակուցներում:
Վեկտորը կարևոր տերմին է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ: Ռեկոմբինանտ ԴՆԹ տեխնոլոգիայի մեջ վեկտորի հիմնական դերը հյուրընկալող բջիջում տեղադրվող ԴՆԹ-ի օգտակար ֆրակցիային տեղափոխման եղանակ ապահովելն է: Ավելին, դա ԴՆԹ-ի մոլեկուլ է, որն օգտագործվում է օտար ԴՆԹ-ի բեկորը արհեստականորեն տեղափոխելու հյուրընկալ բջիջ՝ արտահայտվելու կամ վերարտադրվելու համար: Առավել օգտագործվող վեկտորներն են պլազմիդները, վիրուսային վեկտորները, կոսմիդները և արհեստական քրոմոսոմները:Կլոնավորման վեկտորը և արտահայտման վեկտորը երկու տեսակի վեկտորներ են, որոնք դասակարգվում են իրենց կիրառությունների հիման վրա:
Ի՞նչ է կլոնավորման վեկտորը:
Կլոնավորման վեկտորը ԴՆԹ-ի մի մասն է, որը կարող է օգտագործվել օտար ԴՆԹ-ի մոլեկուլ ներդնելու համար և ունի կլոնավորման նպատակով հյուրընկալողի մեջ տեղադրվելու հատկություն: Կլոնավորման վեկտորի իդեալական բնութագիրը ԴՆԹ-ի հատվածի հեշտ ներդրումն/հեռացումն է սահմանափակող ֆերմենտային մշակման և կապակցող ֆերմենտային մշակման միջոցով: Այս առումով հաճախ օգտագործվող կլոնավորման վեկտորները գենետիկորեն մշակված պլազմիդներն են:
Նկար 01. Կլոնավորման վեկտոր
Կլոնավորման վեկտորը պետք է ունենա բազմակի կլոնավորման տեղամաս, ընտրելի մարկեր գեն և ռեպորտաժային գեն: Կլոնավորման տեղամասի նպատակն է ապահովել կլոնավորման տեղի համար:Ընտրելի մարկերային գենն օգնում է կլոնավորումից հետո հաջողակ ռեկոմբինանտների նույնականացմանը, իսկ ռեպորտաժային գենը թույլ է տալիս զննել և բացահայտել ճիշտ ռեկոմբինանտը կլոնավորումից հետո ռեկոմբինանտների միջև: Կլոնավորման վեկտորը պարտադիր չէ, որ օգնի արտահայտել այն սպիտակուցը, որը կոդավորում է օտար ԴՆԹ-ն: Այսպիսով, կլոնավորման վեկտորի միակ նպատակն է օտար ԴՆԹ տեղափոխել հյուրընկալողին:
Ի՞նչ է արտահայտության վեկտորը:
Արտահայտման վեկտորը, որը նաև կոչվում է արտահայտման կառուցվածք, վեկտորի տեսակ է, որն օգտագործվում է ընդունող բջիջի ներսում սպիտակուցների արտահայտման համար։ Ինչպես ցանկացած վեկտոր, սա նույնպես պետք է պարունակի հիմնական մասերը` բազմակի կլոնավորման կայք, մարկեր գեն և ռեպորտաժային գեն: Վեկտորը նոր գեն է մտցնում հյուրընկալողի մեջ և օգտագործելով հյուրընկալողի սպիտակուցի սինթեզի մեխանիզմը, այն թույլ է տալիս գենին արտահայտվել հյուրընկալողի մեջ: Ավելին, դրա սկզբնական նպատակը կայուն m-RNA-ի ստեղծումն է և դրանով իսկ սպիտակուցներ արտադրելը: Լավ օրինակներից է ինսուլինի կոմերցիոն արտադրությունը: Ինսուլինի գենը ներմուծվում է բակտերիաների պլազմիդի մեջ և նորից մտցվում E.coli բակտերիաների մարմինը, որը թույլ է տալիս պլազմիդներին բազմանալ և թույլ է տալիս E. coli-ին աճել՝ արտազատելով ինսուլին, որը կարելի է հավաքել և օգտագործել:
Նկար 02. Արտահայտման վեկտոր
Այնուհետև, արտահայտման վեկտորը պետք է ունենա ուժեղ խթանող շրջան, թարգմանության մեկնարկի ճիշտ հաջորդականություն և ճիշտ տերմինատոր կոդոն և հաջորդականություն: Արտահայտման վեկտորները բազմաթիվ կիրառություններ ունեն դեղագործական արդյունաբերության համար պեպտիդների և սպիտակուցների արտադրության մեջ, ինչպիսիք են ինսուլինի, աճի հորմոնի, հակաբիոտիկների, պատվաստանյութերի, հակամարմինների արտադրությունը: Ավելին, էքսպրեսիվ վեկտորները օգնում են ֆերմենտների արտադրությանը սննդի և կարի արդյունաբերության մեջ: Ոչ միայն դա, արտահայտման վեկտորները կարևոր են տրանսգեն բույսերի արտադրության համար, ինչպիսիք են ոսկե բրինձը, միջատներին դիմացկուն բույսերը, թունաքիմիկատներին դիմացկուն բույսերը և այլն:
Որո՞նք են նմանությունները կլոնավորման վեկտորի և արտահայտման վեկտորի միջև:
- Կլոնավորման վեկտորը և արտահայտման վեկտորը երկու տեսակի վեկտորներ են, որոնք մենք օգտագործում ենք ռեկոմբինանտ ԴՆԹ տեխնոլոգիայի և գենետիկական ճարտարագիտության մեջ:
- Երկուսն էլ պարունակում են մարկեր գեն և ռեպորտաժային գեն:
- Ավելին, դրանք բաղկացած են բազմաթիվ կլոնավորման կայքերից:
- Նաև նրանք ունեն վերարտադրման ծագում և ինքնակրկնօրինակվելու կարողություն:
Ո՞րն է տարբերությունը կլոնավորման վեկտորի և արտահայտման վեկտորի միջև:
Կլոնավորման վեկտորը ԴՆԹ-ի փոքր մոլեկուլ է, որը տանում է օտար ԴՆԹ-ի հատվածը ընդունող բջիջ, մինչդեռ էքսպրեսիվ վեկտորը վեկտորի տեսակ է, որը հեշտացնում է գեների ներմուծումը, արտահայտումը և սպիտակուցների արտադրությունը: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է կլոնավորման վեկտորի և արտահայտման վեկտորի միջև: Ավելին, կլոնավորման վեկտորի և էքսպրեսիոն վեկտորի միջև մեկ այլ էական տարբերություն այն է, որ կլոնավորման վեկտորը ներմուծում է օտար ԴՆԹ-ի բեկորը հյուրընկալողի մեջ, մինչդեռ էքսպրեսիվ վեկտորներն արտահայտում են ներմուծված գենը՝ արտադրելով համապատասխան սպիտակուց:
Ավելին, կլոնավորման վեկտորը բաղկացած է վերարտադրման սկզբնաղբյուրից, սահմանափակման վայրերից և ընտրելի մարկերից: Մինչդեռ, արտահայտման վեկտորը պարունակում է ուժեղացուցիչներ, խթանող շրջան, ավարտական կոդոն, տառադարձման մեկնարկի հաջորդականություն, վերարտադրության սկզբնաղբյուր, սահմանափակման վայրեր և ընտրելի մարկեր: Հետևաբար, սա նաև տարբերություն է կլոնավորման վեկտորի և արտահայտման վեկտորի միջև: Բացի այդ, պլազմիդները, բակտերիոֆագները, բակտերիալ արհեստական քրոմոսոմները, կոսմիդները, կաթնասունների արհեստական քրոմոսոմները, խմորիչի արհեստական քրոմոսոմը և այլն, կլոնավորման վեկտորների օրինակներ են։ Մինչդեռ արտահայտման վեկտորները հիմնականում պլազմիդներ են։
Ամփոփում – Կլոնավորման վեկտոր ընդդեմ արտահայտման վեկտորի
Հիմք ընդունելով մոլեկուլային կենսաբանության մեջ իրենց ֆունկցիան՝ գոյություն ունեն երկու տեսակի վեկտորներ՝ որպես կլոնավորման վեկտոր և արտահայտման վեկտոր:Կլոնավորման վեկտորը ԴՆԹ-ի փոքր մոլեկուլ է, որը օտար ԴՆԹ է փոխանցում ընդունող բջիջ: Գոյություն ունեն կլոնավորման վեկտորների տարբեր տեսակներ, ինչպիսիք են պլազմիդները, բակտերիոֆագները, բակտերիալ արհեստական քրոմոսոմները, կոսմիդները և կաթնասունների արհեստական քրոմոսոմները: Ի հակադրություն, արտահայտման վեկտորը պլազմիդ է, որը ներմուծում է հետաքրքրող գենը հյուրընկալող բջիջ և հեշտացնում է գենի արտահայտումը սպիտակուցային արտադրանք ստանալու համար: Արտահայտման վեկտորները պլազմիդներ են։ Այսպիսով, սա կլոնավորման վեկտորի և արտահայտման վեկտորի միջև եղած տարբերության ամփոփումն է։