Ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի հիմնական տարբերությունն այն է, որ ռադիոակտիվ զոնդերը միաշղթա ԴՆԹ կամ ՌՆԹ հաջորդականություններ են, որոնք պիտակավորված են ռադիոակտիվ իզոտոպներով, մինչդեռ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը միաշղթա ԴՆԹ կամ ՌՆԹ հաջորդականություններ են, որոնք պիտակավորված են քիմիական պիտակով կամ լյումինեսցենտային պիտակ։
Նուկլեինաթթվի հիբրիդացումը կարևոր տեխնիկա է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ, հատկապես մանրէաբանական ախտորոշման մեջ: Այն օգնում է բացահայտել կամ հայտնաբերել նուկլեինաթթվի որոշակի հաջորդականություն: Այս տեխնիկայում նուկլեինաթթուները ամրացվում են պինդ մակերեսի վրա և հիբրիդացվում զոնդով: Զոնդը ԴՆԹ-ի կամ ՌՆԹ-ի մի հատված է, որը լրացնում է հետաքրքրող հաջորդականությունը:Եթե թիրախային հաջորդականությունը առկա է նմուշում, զոնդը կհիբրիդացվի դրա հետ և կդարձնի այն հայտնաբերելի: Գոյություն ունեն երկու տեսակի զոնդեր՝ ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ: Հետևաբար, մենք կարող ենք պիտակավորել զոնդերը ռադիոակտիվ պիտակով կամ լյումինեսցենտային պիտակով:
Ի՞նչ են ռադիոակտիվ զոնդերը:
Ռադիոակտիվ զոնդերը ռադիոակտիվ պիտակով միաշղթա ԴՆԹ կամ ՌՆԹ բեկորներ են: Ռադիոիզոտոպները օգտագործվում են ռադիոակտիվ զոնդերի պատրաստման համար: Ռադիոիզոտոպները 32P, 33P և 35S սովորաբար օգտագործվում են զոնդերի պիտակավորման մեջ: Ավելին, 3H և 1251 ռադիոիզոտոպները նույնպես օգտագործվում են ավելի քիչ չափով զոնդերի պիտակավորման մեջ: Բայց դրանք օգտագործվում են հատուկ ծրագրերի համար: Տարբեր ռադիոիզոտոպների շարքում 32P-ն ամենաշատ օգտագործվող իզոտոպն է ռադիոակտիվ զոնդերի պիտակավորման համար:
Ռադիոակտիվ զոնդերն ապահովում են հուսալիության և յուրահատկության ավելի բարձր աստիճան: Հետևաբար, դրանք ապահովում են առավելագույն զգայունություն և թույլ են տալիս ճշգրիտ չափել թիրախային հաջորդականությունները:Այնուամենայնիվ, ռադիոակտիվ զոնդերի հետ կապված կան մի քանի թերություններ: Նրանք կարճ կիսատ կյանք ունեն։ Ավելին, դրանք վտանգավոր են, և արտադրությունը, օգտագործումը և հեռացումը խնդրահարույց են բեռնաթափման ժամանակ: Բացի այդ, ռադիոակտիվ զոնդի պատրաստումը ծախսատար գործընթաց է: Հետևաբար, անվտանգության խնդիրների և ծախսերի պատճառով ռադիոակտիվ զոնդերը այսօր չեն օգտագործվում որպես ոչ ռադիոակտիվ զոնդեր:
Ի՞նչ են ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը:
Ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը քիմիապես պիտակավորված զոնդերի երկրորդ տեսակն են: Digoxigenin-ը ոչ ռադիոակտիվ զոնդ է, որը հակամարմինների վրա հիմնված մարկեր է: Digoxigenin զոնդերը հատուկ են և զգայուն: Բիոտինը ևս մեկ պիտակ է, որն օգտագործվում է ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի պատրաստման մեջ: Biotin/Streptavidin և Digoxigenin/Antibody-detection համակարգերը հիբրիդացման ժամանակ առավել հաճախ օգտագործվող ոչ ռադիոակտիվ զոնդերն են: Ավելին, ծովաբողկի պերօքսիդազային համակարգը ևս մեկ ոչ ռադիոակտիվ զոնդային համակարգ է: Երբ այս ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը հիբրիդացվում են թիրախային հաջորդականությունների հետ, դրանք կարող են հայտնաբերվել ավտոռադիոգրաֆիայի կամ այլ պատկերային տեխնիկայի միջոցով:
Նկար 01. Հիբրիդացում ոչ ռադիոակտիվ զոնդերով
Ոչ ռադիոակտիվ զոնդերն ավելի հաճախ օգտագործվում են նուկլեինաթթվի հիբրիդացման ժամանակ, քան ռադիոակտիվ զոնդերը: Դա պայմանավորված է նրանով, որ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը կապված չեն վտանգավոր նյութերի հետ: Ավելին, ոչ ռադիոակտիվ հայտնաբերման մեթոդները պահանջում են ավելի կարճ ազդեցության ժամանակներ՝ հիբրիդացման ազդանշանը հայտնաբերելու համար: Այնուամենայնիվ, ոչ ռադիոակտիվ զոնդերով ԴՆԹ-ի հիբրիդացման հետ կապված քայլերը սովորաբար հոգնեցուցիչ են և ժամանակատար: Ավելին, կոմերցիոն հասանելի լուծումները թանկ են։
Որո՞նք են նմանությունները ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի միջև:
- Ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը երկու տեսակի զոնդեր են, որոնք օգտագործվում են նուկլեինաթթվի հիբրիդացման մեջ:
- Նրանք հեշտացնում են նմուշի թիրախային հաջորդականությունների հայտնաբերումը:
- Զոնդերի երկու տեսակները հավասարապես զգայուն և հատուկ են:
Ո՞րն է տարբերությունը ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի միջև:
Ռադիոակտիվ զոնդերը ռադիոակտիվ իզոտոպներով պիտակավորված միաշղթա ԴՆԹ կամ ՌՆԹ հաջորդականություններ են, մինչդեռ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը քիմիական պիտակով պիտակավորված միաշղթա ԴՆԹ կամ ՌՆԹ հաջորդականություններ են: Այսպիսով, սա ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի հիմնական տարբերությունն է: Բացի այդ, ռադիոակտիվ իզոտոպները վտանգավոր են: Հետևաբար, ռադիոակտիվ զոնդերը զգալիորեն վտանգավոր են, մինչդեռ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը վտանգավոր չեն:
Ավելին, ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի միջև մեկ այլ տարբերություն նրանց թերություններն են: Կարճ կիսամյակը և դրանց արտադրության, օգտագործման և հեռացման հետ կապված վտանգները ռադիոակտիվ զոնդերի օգտագործման թերություններն են: Մյուս կողմից, ոչ ռադիոակտիվ զոնդերով ԴՆԹ-ի հիբրիդացման հետ կապված քայլերը սովորաբար հոգնեցուցիչ են և ժամանակատար:
Ստորև ինֆոգրաֆիկայում ցուցադրվում են ավելի շատ համեմատություններ՝ կապված ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի տարբերության հետ:
Ամփոփում – Ռադիոակտիվ ընդդեմ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի
Զոնդը ԴՆԹ-ի կամ ՌՆԹ-ի հատված է, որը պարունակում է նուկլեոտիդային հաջորդականություն, որը լրացնում է հետաքրքրող հաջորդականությունը: Թիրախային հաջորդականությունը հայտնաբերելու համար զոնդերը կարող են պիտակավորվել ռադիոակտիվ, լյումինեսցենտային կամ քիմիական եղանակով: Զոնդերը կապվում են նմուշի լրացուցիչ հաջորդականությունների հետ: Ռադիոակտիվ զոնդերը պիտակավորված են ռադիոակտիվ իզոտոպներով, մինչդեռ ոչ ռադիոակտիվ զոնդերը պիտակավորված են բիոտինով, դիգոքսիգենինով կամ ծովաբողկի պերօքսիդազով: Այսպիսով, սա է ռադիոակտիվ և ոչ ռադիոակտիվ զոնդերի հիմնական տարբերությունը:
