Հիմնական տարբերություն – Իմունֆլյորեսցենցիան ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի
Հիվանդությունների ախտորոշումը, որն օգտագործում է մոլեկուլային կենսաբանական մեթոդներ, դարձել է կլինիկական լաբորատոր տեխնոլոգիայի նոր ոլորտ: Այն ներառում է բոլոր թեստերն ու մեթոդները՝ հիվանդությունը բացահայտելու և հիվանդության պատճառը հասկանալու համար՝ վերլուծելով ԴՆԹ-ն, ՌՆԹ-ն կամ օրգանիզմում արտահայտված սպիտակուցները: Մոլեկուլային ախտորոշման արագ առաջընթացը հնարավորություն է ընձեռել հիմնական հետազոտություններ կատարել վարակիչ և ոչ վարակիչ հիվանդությունների վերաբերյալ: Դրանք օգտագործվում են հիվանդության մեջ ներգրավված կարևոր գեների կամ սպիտակուցների հաջորդականության կամ արտահայտման մակարդակների փոփոխությունները որոշելու համար: Իմունոֆլյորեսցենցիան (IF) և իմունոհիստոքիմիան (IHC) քաղցկեղի կենսաբանության մեջ լայնորեն կիրառվող երկու մեթոդներ են:IF-ը IHC-ի մի տեսակ է, որտեղ ֆլուորեսցենտային հայտնաբերման մեթոդն օգտագործվում է մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմինները վերլուծելու համար, մինչդեռ IHC-ն օգտագործում է քիմիական մեթոդներ՝ մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմինները հայտնաբերելու համար: Սա IF-ի և IHC-ի հիմնական տարբերությունն է:
Ի՞նչ է իմունֆլյորեսցենտությունը (IF):
Իմունոֆլյորեսցենցիան հայտնաբերման տեխնիկա է, որտեղ վերլուծության մեջ օգտագործվող հակամարմինները պիտակավորված են՝ օգտագործելով լյումինեսցենտային ներկանյութեր կամ լյումինեսցենտային սպիտակուցներ՝ հայտնաբերման նպատակով: Նշված երկրորդական հակամարմինները կարող են հանգեցնել անցանկալի ֆոնային ազդանշանների. Հետևաբար, IF տեխնիկան հիմնված է ներկայումս առաջնային հակամարմինի պիտակավորման վրա՝ հայտնաբերման ժամանակ անցանկալի ազդանշաններից խուսափելու համար: Այս տեխնիկայի միջոցով կանխվում է առաջնային և երկրորդային հակամարմինների միջև ոչ սպեցիֆիկ կապը, և դա ավելի արագ է, քանի որ չկա երկրորդական ինկուբացիոն քայլ: Տվյալների որակը նույնպես բարելավվել է։
Նկար 01. Կրկնակի իմունոֆլյորեսցենտային ներկում BrdU, NeuN և GFAP համար
Ֆտորոքրոմները կամ լյումինեսցենտային ներկերը միացություններ են, որոնք կարող են կլանել ճառագայթումը, գերադասելի է ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումը, որը գրգռված է: Երբ մասնիկները գրգռված վիճակից հասնում են հիմնական վիճակին, նրանք արձակում են ճառագայթում, որը գրավվում և հայտնաբերվում է դետեկտորի կողմից՝ ձևավորելով սպեկտր: Շատ կարևոր է, որ լյումինեսցենտային պիտակը համատեղելի և կայուն լինի կոնկրետ ռեակցիայի համար, և այն պետք է պատշաճ կերպով միացվի հակամարմինին՝ ճշգրիտ արդյունքներ ստանալու համար: Ամենաշատ օգտագործվող ֆտորոքրոմներից մեկը ֆլուորեսցեին իզոթիոցիանատն է (FITC), որը կանաչ գույնի է, կլանման և արտանետման գագաթնակետային ալիքների երկարությամբ՝ համապատասխանաբար 490 նմ և 520 նմ։ Ռոդամինը, IF-ում օգտագործվող մեկ այլ նյութ, կարմիր գույն ունի և ունի հստակ կլանման և արտանետման ալիքի երկարություն՝ 553 նմ և 627 նմ:
Ի՞նչ է իմունոհիստոքիմիան (IHC):
IHC-ը մոլեկուլային փորձարկման մեթոդ է, որն օգտագործվում է թիրախ բջիջում հակագենի առկայությունը հայտնաբերելու և հաստատելու համար: Թիրախային բջիջը կարող է լինել վարակիչ մասնիկ, մանրէաբանական պաթոգեն կամ չարորակ ուռուցքային բջիջ: IHC-ն օգտագործում է մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմիններ՝ որոշելու թիրախ բջիջների բջիջների մակերեսին առկա անտիգենների առկայությունը: Տեխնիկան հիմնված է հակագեն-հակամարմին կապելու վրա: Հայտնաբերման մարկերը միացվում է այս հակամարմիններին՝ որոշակի հակագենի առկայությունը կամ բացակայությունը հայտնաբերելու համար: Այս մարկերները կարող են լինել քիմիական մարկերներ, ինչպիսիք են ֆերմենտները, ֆլյուորեսցենտով պիտակավորված հակամարմինները կամ ռադիոպիտակավորված հակամարմինները:
Նկար 02. Իմունոհիստոքիմիայի միջոցով ներկված մուկ-ուղեղի հատված
IHC-ի ամենահայտնի կիրառությունը քաղցկեղի բջիջների կենսաբանության մեջ է՝ հայտնաբերելու չարորակ ուռուցքների առկայությունը, սակայն այն նաև օգտագործվում է վարակիչ հիվանդությունների հայտնաբերման համար:
Որո՞նք են նմանությունները իմունֆլյորեսցենցիայի և իմունոհիստոքիմիայի միջև:
- Իմունոֆլյորեսցիան և իմունոհիստոքիմիան տեղի են ունենում in vitro պայմաններում:
- Երկու տեխնիկան էլ հիմնված է հակագեն-հակամարմին
- Երկուսն էլ շատ արագ տեխնիկա են։
- Տեխնիկայի արդյունքները վերարտադրելի են:
- Երկուսն էլ բարելավել են տվյալների որակը:
- Այս տեխնիկան օգտագործվում է քաղցկեղի և վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշման մեջ:
Ո՞րն է տարբերությունը իմունոֆլյորեսցիայի և իմունոհիստոքիմիայի միջև:
Իմունֆլյորեսցենս ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի |
|
| IF-ը հայտնաբերման տեխնիկա է, որտեղ վերլուծության մեջ օգտագործվող հակամարմինները պիտակավորված են՝ օգտագործելով լյումինեսցենտային ներկանյութեր կամ լյումինեսցենտ սպիտակուցներ՝ հայտնաբերման համար: | IHC-ը հայտնաբերման տեխնիկա է, որտեղ վերլուծության մեջ օգտագործվող հակամարմինները պիտակավորված են քիմիական նյութերի կամ ռադիոակտիվ տարրերի միջոցով հայտնաբերման համար: |
| Ճշգրտություն | |
| Ճշգրտությունն ավելի բարձր է IF տեխնիկայում՝ համեմատած IHC-ի հետ: | Ճշգրտությունն ավելի ցածր է IHC-ում: |
| Հատուկություն | |
| Եթե ավելի կոնկրետ է։ | IHC-ն ավելի քիչ կոնկրետ է: |
Ամփոփում – Իմունֆլյորեսցենս ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի
Մոլեկուլային մեխանիզմները բազմաթիվ փոփոխություններ են բերել բժշկության ոլորտում՝ առաջացնելով մոլեկուլային փորձարկման առաջադեմ մեթոդներ, որոնք հեղափոխություններ են առաջացրել ախտորոշման ոլորտում:Այս գյուտերը հանգեցրել են հիվանդության արագ և ճշգրիտ նույնականացմանն ու հաստատմանը, դրանով իսկ հնարավորություն տալով դեղերի հաջող վարում և արտադրություն: Այս տեխնիկան օգտագործվում է նաև դեղագիտության մեջ՝ դեղերի թիրախները գտնելու և դեղամիջոցի ֆարմակոկինետիկ հատկությունները դեղերի նյութափոխանակության ընթացքում հաստատելու համար։ IF-ը և IHC-ն ախտորոշման երկու մեթոդներ են, որոնք հիմնված են անտիգենի և հակամարմինների կապակցման հայեցակարգի վրա, թեև հայտնաբերման եղանակները երկու տեխնիկայում էլ տարբերվում են: IF-ն օգտագործում է ֆլյուորեսցենցիայի սկզբունքը հակագենը հայտնաբերելու համար, իսկ IHC-ն օգտագործում է քիմիական կոնյուգացիայի հայեցակարգը՝ անտիգենը հայտնաբերելու համար: Սա է տարբերությունը IF-ի և IHC-ի միջև:
Ներբեռնեք իմունոֆլյորեսցենցիայի PDF տարբերակն ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի
Դուք կարող եք ներբեռնել այս հոդվածի PDF տարբերակը և օգտագործել այն անցանց նպատակներով՝ ըստ մեջբերումների: Խնդրում ենք ներբեռնել PDF տարբերակը այստեղ Իմունֆլյուորեսցիայի և իմունոհիստոքիմիայի միջև տարբերությունը:
