Հիմնական տարբերություն – In Situ հիբրիդացում ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի
Քաղցկեղի և վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշումը հանրաճանաչ միտում է, որտեղ նոր պրոտեոմիկայի և գենոմիկայի վրա հիմնված տեխնիկան օգտագործվում է ուռուցքների կամ վարակիչ բջիջների նույնականացման, դրանց տարածման և բջիջների զարգացման վայրերի և գենետիկական հիմքերի վերլուծության նպատակով: ոչ վարակիչ հիվանդություններ. Սա կհանգեցնի դեղերի ճշգրիտ մշակմանը և ձևավորմանը, ինչպես նաև կմշակի հիվանդությունների բուժման հարմարեցված մեթոդները: In situ հիբրիդացումը (ISH) և իմունահիստոքիմիան (IHC) քաղցկեղի կենսաբանության մեջ լայնորեն կիրառվող երկու տեխնիկա են, և տեղում հիբրիդացման և իմունաքիմիայի միջև հիմնական տարբերությունը կայանում է մոլեկուլների մեջ, որոնք օգտագործվում են վերլուծության ընթացակարգում:ISH-ում նուկլեինաթթուների զոնդերն օգտագործվում են վերլուծության մեջ, մինչդեռ IHC-ում մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմիններն օգտագործվում են ախտորոշման որոշման համար:
Ի՞նչ է In Situ հիբրիդացումը (ISH):
In situ հիբրիդացումը նուկլեինաթթվի հիբրիդացման մեթոդ է, որն ուղղակիորեն իրականացվում է հյուսվածքի մի մասի կամ հատվածի վրա, ամբողջ հյուսվածքում կամ բջիջներում: Տեխնիկան կախված է Watson Crick-ի կոմպլեմենտար հիմքերի զուգակցման տեսությունից, ինչը հանգեցնում է ԴՆԹ-ԴՆԹ հիբրիդների կամ ԴՆԹ-ՌՆԹ հիբրիդների, որոնք կարող են հայտնաբերել մուտացված գեները կամ բացահայտել հետաքրքրող պահանջվող գենը: ԴՆԹ-ի միաշղթա հաջորդականությունը, երկշղթա ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը, միաշղթա ՌՆԹ-ի կամ սինթետիկ օլիգոնուկլեոտիդային հաջորդականությունները օգտագործվում են որպես զոնդ հիբրիդացման տեխնիկայի ժամանակ, և այդ զոնդերը պիտակավորված են ռադիոակտիվ ֆոսֆորով իր 5' ծայրում՝ նույնականացման ընթացակարգերի համար՝ օգտագործելով ավտոռադիոգրաֆիա կամ պիտակավորված դիագրաֆիա:. Գոյություն ունեն ISH տեխնիկայի տարբեր տեսակներ՝ ելնելով օգտագործված զոնդի տեսակից և հետևվող վիզուալացման տեխնիկայից:
Նկար 01. Լյումինեսցենտ In Situ հիբրիդացում
Կան ISH-ի բազմաթիվ կիրառություններ, հիմնականում վարակիչ հիվանդությունների մոլեկուլային ախտորոշման մեջ՝ պաթոգենների առկայությունը պարզելու և մոլեկուլային ախտորոշման միջոցով պաթոգենը հաստատելու համար: Այն նաև օգտագործվում է զարգացման կենսաբանության, կարիոտիպավորման և ֆիլոգենետիկ վերլուծության և քրոմոսոմների ֆիզիկական քարտեզագրման ոլորտներում:
Ի՞նչ է իմունոհիստոքիմիան (IHC):
IHC-ի տեխնիկայում վերլուծված հիմնական մոլեկուլը հակագենն է: IHC-ի ժամանակ մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմինները օգտագործվում են վարակի կամ չարորակ բջիջների տարածման կարգավիճակում անտիգենների առկայությունը որոշելու համար: Տեխնիկան հիմնված է հակագեն-հակամարմին կապելու վրա, և այս տեխնիկայի համար օգտագործվում են ֆերմենտային պիտակներ. Այդպիսի կիրառություններից մեկը ELISA-ն է (Ֆերմենտային կապակցված իմունոսորբենտային հետազոտություն):Մարկերները կարող են լինել նաև լյումինեսցենտային պիտակավորված հակամարմիններ կամ ռադիոպիտակավորված հակամարմիններ:
Գծապատկեր 02. Իմունոհիստոքիմիա
IHC-ը լայնորեն օգտագործվում է քաղցկեղի բջիջների հայտնաբերման համար: Ախտորոշիչ ընթացակարգերը ուղղված են ուռուցքային բջիջների վրա առկա անտիգեններին՝ հայտնաբերելու և բնութագրելու ուռուցքը: Նույն ընթացակարգը ներառված է վարակիչ գործակալների ախտորոշման համար: Մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմինները նաև օգտագործվում են տարբեր գենային արտադրանքների վերլուծության համար՝ հնարավորություն տալով հակամարմին-հակագին կապող ռեակցիան ցանկալի սպիտակուցի և կիրառվող սինթետիկ հակամարմինների միջև:
Որո՞նք են նմանությունները In Situ հիբրիդացման և իմունոհիստոքիմիայի միջև:
- ISH-ը և IHC-ը խիստ սպեցիֆիկ ռեակցիաներ են:
- Երկու տեխնիկան էլ շատ ճշգրիտ են։
- Երկու մեթոդներն էլ կարող են օգտագործվել քաղցկեղի և վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշման մեջ։
- Այս տեխնիկան իրականացվում է ստերիլ in-vitro միջավայրում:
- Երկուսն էլ արագ տեխնիկա են, որոնք ապահովում են վերարտադրելի արդյունքներ:
- ISH-ը և IHC-ն օգտագործում են հայտնաբերման մեթոդներ, ինչպիսիք են ռադիոպիտակավորումը և լյումինեսցենտային տեխնիկան:
Ո՞րն է տարբերությունը In Situ հիբրիդացման և իմունոհիստոքիմիայի միջև:
In situ հիբրիդացում ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի |
|
| ISH-ը նուկլեինաթթվի հիբրիդացման տեխնիկա է, որն ուղղակիորեն իրականացվում է հյուսվածքի մի մասի կամ հատվածի կամ ամբողջ հյուսվածքի վրա: | IHC-ն տեխնիկա է, որտեղ մոնոկլոնալ և պոլիկլոնալ հակամարմիններն օգտագործվում են անտիգենների առկայությունը որոշելու համար, որոնք հատուկ սպիտակուցային մարկերներ են, որոնք տեղադրված են բջջային մակերեսների վրա: |
| Վերլուծված կենսամոլեկուլների տեսակը | |
| ISH-ը վերլուծում է նուկլեինաթթուները: | IHC-ն վերլուծում է սպիտակուցներ-հակիգեններ: |
| Կենսաքիմիական ռեակցիայի հիմքը | |
| Կոմպլեմենտար հիմքերի զուգավորում ԴՆԹ-ԴՆԹ-ի կամ ԴՆԹ-ՌՆԹ-ի միջև տեղի է ունենում այս տեխնիկայում: | Հակագեն-հակամարմին փոխազդեցությունները ներգրավված են իմունոհիստոքիմիայի մեջ: |
| Ֆերմենտների հետ կապված հայտնաբերման մեթոդներ | |
| Ֆերմենտների հետ կապված հայտնաբերման մեթոդները չեն կարող օգտագործվել ISH-ում: | Ֆերմենտների հետ կապված հայտնաբերման մեթոդները կարող են օգտագործվել IHC-ում: |
Ամփոփում – In Situ հիբրիդացում ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի
Մոլեկուլային ախտորոշումը արագ և հաստատող մեթոդներ են, որոնք կարող են օգտագործվել ոչ վարակիչ հիվանդությունների հայտնաբերման համար, ինչպիսիք են քաղցկեղը կամ վարակիչ հիվանդությունը, ինչպիսին է ՄԻԱՎ-ը կամ տուբերկուլյոզը, հիմնվելով բջիջների վրա առկա մոլեկուլային մարկերների վրա, որոնք հանգեցնում են հիվանդության դրսևորմանը:. Մոլեկուլային մարկերները կարող են առկա լինել արտահայտված սպիտակուցների տեսքով կամ գենետիկ մակարդակում, որոնց հիման վրա ներդրվում են տարբեր նոր մեթոդներ՝ արդյունավետությունը բարձրացնելու համար և ավելի քիչ աշխատատար են, թեև այդ տեխնիկայի հետ կապված մեծ ծախսեր կան: Այսպիսով, ISH-ը կախված է ԴՆԹ-ԴՆԹ կամ ԴՆԹ-ՌՆԹ հիբրիդային ձևավորումից, իսկ IHC-ն կախված է հակամարմինների և հակագենի միջև հատուկ ռեակցիաներից: Սա է տարբերությունը in situ հիբրիդացման միջև:
Ներբեռնեք In Situ հիբրիդացումն ընդդեմ իմունոհիստոքիմիայի PDF տարբերակը
Դուք կարող եք ներբեռնել այս հոդվածի PDF տարբերակը և օգտագործել այն անցանց նպատակներով՝ ըստ մեջբերումների: Խնդրում ենք ներբեռնել PDF տարբերակը այստեղ Տարբերությունը In Situ հիբրիդացման և իմունոհիստոքիմիայի միջև:
