Հիմնական տարբերություն – մազանոթային էլեկտրոֆորեզ ընդդեմ գելային էլեկտրոֆորեզ
Էլեկտրոֆորեզը տեխնիկա է, որն օգտագործվում է բիոմոլեկուլները բաժանելու համար՝ հիմնվելով մասնիկների լիցքի, մասնիկի չափի և մասնիկի ձևի վրա: Մոլեկուլի միգրացիան, որը հայտնի է որպես էլեկտրոֆորետիկ շարժունակություն, կախված է օգտագործվող պոլիմերի/գելի տեսակից, ծակոտիների չափից, տրամադրվող լարումից, գործարկման ժամանակից և մակերեսի ծավալի հարաբերակցությունից: Գոյություն ունեն էլեկտրոֆորեզի տարբեր տեսակներ՝ հիմնված օգտագործվող բիոմոլեկուլի տեսակի վրա: Էլեկտրաֆորեզի առաջին տեսակը, որը հայտնագործվել է, թղթի էլեկտրոֆորեզն էր, որտեղ նիտրոցելյուլոզային թուղթն օգտագործվում էր որպես կենսամոլեկուլների տարանջատման միջավայր:Գելային էլեկտրոֆորեզի սկզբունքը, որտեղ բիոմոլեկուլները բաժանելու համար օգտագործվում էին տարբեր ծակոտկեն չափի գելեր, հորինվել է ավելի ուշ: Գելային էլեկտրոֆորեզի տեխնիկան հետագայում փոփոխվել է տեխնիկայի ճշգրտությունը բարելավելու համար, և այդպիսի մոդիֆիկացիաներից մեկը մազանոթային էլեկտրոֆորեզն է: Մազանոթային էլեկտրոֆորեզի և գելային էլեկտրոֆորեզի հիմնական տարբերությունն այն է, որ գելային էլեկտրոֆորեզը կատարվում է ուղղահայաց կամ հորիզոնական հարթության վրա՝ օգտագործելով ստանդարտ ծակոտկեն չափի պոլիմերային գել, մինչդեռ մազանոթային էլեկտրոֆորեզը կատարվում է մազանոթ խողովակի մեջ՝ պոլիմերային հեղուկով կամ գելով:
Ի՞նչ է գելային էլեկտրոֆորեզը:
Գելային էլեկտրոֆորեզը տեխնիկա է, որն օգտագործվում է հիմնականում նուկլեինաթթուների, սպիտակուցների կամ ամինաթթուների առանձնացման համար՝ ելնելով դրանց լիցքից, չափից և ձևից: Այս տեխնիկան օգտագործում է ֆիզիկական գել, որը պոլիմերային նյութ է, որպես տարանջատման միջոց: Առավել հաճախ օգտագործվող գելերն են Ագարոզը (նուկլեինաթթուների բաժանման համար) և պոլիակրիլամիդը (սպիտակուցների բաժանման համար): Գելային էլեկտրոֆորետիկ ապարատը պարունակում է գել ձուլման սկուտեղ՝ գելը պատրաստելու համար, ձուլման սանրեր՝ հորերը պատրաստելու համար, բուֆերային բաք, էլեկտրոդներ՝ դրական (անոդ) և բացասական (կաթոդ) և լարման սնուցման միավոր:ԴՆԹ-ի կամ ՌՆԹ-ի նման մոլեկուլները, որոնք բացասաբար լիցքավորված են, կաթոդից շարժվում են դեպի անոդ, իսկ դրական լիցքավորված մոլեկուլները շարժվում են հակառակը: Գելի պատրաստումը կատարվում է ըստ պահանջի։ Եթե պահանջվում է մոլեկուլների բարձր լուծաչափություն կամ տարանջատում, ապա պետք է պատրաստել բարձր կոնցենտրացիայի գել՝ ավելի փոքր ծակոտկեն չափով: Գելային մատրիցայի վրա առանձնացված մոլեկուլները դիտվում են ներկման տեխնիկայից հետո: Առանձնացված մոլեկուլները հայտնվում են որպես ժապավեններ գելային մատրիցայի վրա:
Նկար 01. Գելային էլեկտրոֆորեզ
Գելային էլեկտրոֆորեզն օգտագործվում է մոլեկուլային ախտորոշման մեջ, ինչպիսին է ԴՆԹ-ի մատնահետքերը՝ որոշ ԴՆԹ/ՌՆԹ-ի որոշակի հատվածի կամ սպիտակուցի առկայությունը: Գելային էլեկտրոֆորեզը նաև որոշում է արդյունահանված բիոմոլեկուլի նմուշի մաքրությունը:Գելային էլեկտրոֆորեզը կատարվում է որպես նախնական քայլ և հիբրիդացման համար և որպես հաստատող վերլուծություն հաջորդականությունից հետո:
Ի՞նչ է մազանոթային էլեկտրոֆորեզը:
Մազանոթային էլեկտրոֆորեզը գելային էլեկտրոֆորեզի փոփոխություն է, որն օգտագործում է տարանջատման նույն սկզբունքը՝ հիմնված լիցքի, մոլեկուլի չափի վրա, բայց իրականացվում է մազանոթ խողովակում կամ գելային նյութով կամ հեղուկ պոլիմերով: Մազանոթները պատրաստվում են միաձուլված սիլիցիումից, և յուրաքանչյուր մազանոթ խողովակ ունի 50-100 մկմ ներքին տրամագիծ և 25-100 սմ երկարություն: Նմուշները ներարկվում են պոլիմերային նյութ պարունակող մազանոթ խողովակի մեջ և բաժանվում են շատ արագ, քան սովորական գելային էլեկտրոֆորեզը: Մազանոթային համակարգը լավ պաշտպանված է մեկուսիչ բաճկոնի ներսում, որը պաշտպանում է նմուշը ցանկացած աղտոտումից: Մազանոթները կարող են լցված լինել հեղուկ պոլիմերներով, ինչպիսիք են հիդրօքսիէթիլ ցելյուլոզը կամ բարձր լուծաչափով գելեր, ինչպիսիք են պոլիակրիլամիդը: Մազանոթային էլեկտրոֆորեզը ապահովում է ավելի մեծ լուծում; հետևաբար տարանջատումն ավելի ճշգրիտ է:Մազանոթային էլեկտրոֆորեզը օգտագործում է ավտոմատ դետեկտորային համակարգ՝ սպեկտրոֆոտոմետրիկ վերլուծության միջոցով: Դա պայմանավորված է մակերեսի և ծավալի ավելի մեծ հարաբերակցությամբ:
Նկար 02. մազանոթային էլեկտրոֆորեզ
Մազանոթային էլեկտրոֆորեզն օգտագործվում է այնպիսի իրավիճակներում, ինչպիսիք են դատաբժշկական փորձաքննությունները, որտեղ ավելի բարձր ճշգրտություն է պահանջվում, և սովորաբար չի օգտագործվում, քանի որ դա ծախսատար տեխնիկա է:
Որո՞նք են նմանությունները մազանոթային էլեկտրոֆորեզի և գելային էլեկտրոֆորեզի միջև:
- Մոլեկուլների տարանջատումը երկու տեխնիկայում էլ հիմնված է մոլեկուլի լիցքի և չափի վրա:
- Երկու մեթոդներն էլ կարող են օգտագործվել ինչպես նուկլեինաթթուները, այնպես էլ սպիտակուցները բաժանելու համար:
- Երկու տեխնիկայի նմուշի ծավալը նույնն է:
- Երկու տեխնիկան էլ օգտագործում են բուֆեր՝ բաժանումը հեշտացնելու համար:
Ո՞րն է տարբերությունը մազանոթային էլեկտրոֆորեզի և գելային էլեկտրոֆորեզի միջև:
Մազանոթային էլեկտրոֆորեզ ընդդեմ գելային էլեկտրոֆորեզ |
|
| Մազանոթային էլեկտրոֆորեզը մեթոդ է, որը բաժանում է բիոմոլեկուլները մազանոթ խողովակի վրա՝ օգտագործելով հեղուկ կամ գելային պոլիմերային միջավայր: | Գելային էլեկտրոֆորեզը մեթոդ է, որը բաժանում է բիոմոլեկուլները ուղղահայաց կամ հորիզոնական հարթության վրա՝ օգտագործելով պոլիմերային գելային միջավայր: |
| Բաժանում | |
| Մազանոթային էլեկտրոֆորեզում տարանջատումը կատարվում է մազանոթ խողովակի ներսում: | Գելային էլեկտրոֆորեզում բաժանումը կատարվում է ուղղահայաց կամ հորիզոնական հարթության վրա: |
| բաժանման միջին | |
| Հեղուկ պոլիմերներ, ինչպիսին է հիդրօքսիէթիլցելյուլոզը, օգտագործվում են մազանոթային էլեկտրոֆորեզում: | Գելերը՝ կա՛մ ագարոզա, կա՛մ պոլիակրիլամիդ, օգտագործվում են որպես գելային էլեկտրոֆորեզի միջավայր: |
| Խաչ կապ | |
| Բարձր լուծաչափը կարելի է ձեռք բերել մազանոթային էլեկտրոֆորեզից: | Գելային էլեկտրոֆորեզի լուծաչափը ցածր է: |
| Մակերևույթի և ծավալի հարաբերակցություն | |
| Մակերեւույթի և ծավալի հարաբերակցությունը մազանոթային էլեկտրոֆորեզում բարձր է: | Մակերևույթի և ծավալի հարաբերակցությունը ցածր է գելային էլեկտրոֆորեզում: |
| Հայտնաբերման տեխնիկա | |
| Հայտնաբերումը կատարվում է սպեկտրոֆոտոմետրիկ ավտոմատ դետեկտորների միջոցով մազանոթային էլեկտրաֆորեզում: | Գունավորումը և դիտարկումը ուլտրամանուշակագույն տրանսլյումինատորի միջոցով կատարվում են որպես գելային էլեկտրոֆորեզի հայտնաբերման տեխնիկա: |
Ամփոփում – Մազանոթային էլեկտրոֆորեզ ընդդեմ գելային էլեկտրոֆորեզ
Մոլեկուլային ախտորոշումը մեծ դեր է խաղում գիտական աշխարհում: ԴՆԹ-ի, ՌՆԹ-ի և սպիտակուցների նույնականացումն ու մաքրումը ախտորոշիչ ընթացակարգերի կարևորագույն քայլերն են: Էլեկտրոֆորեզը տեխնիկա է, որն առանձնացնում և նույնացնում է բիոմոլեկուլները ինչպես գելային էլեկտրոֆորեզում, այնպես էլ շատ առաջադեմ մազանոթային գելային էլեկտրոֆորեզում: Գելային էլեկտրոֆորեզը կատարվում է ուղղահայաց կամ հորիզոնական հարթությունում, օգտագործելով ստանդարտ ծակոտկեն չափի պոլիմերային գել, մինչդեռ մազանոթային էլեկտրոֆորեզը կատարվում է մազանոթ խողովակում պոլիմերային հեղուկով կամ գելով: Սա է տարբերությունը մազանոթային էլեկտրոֆորեզի և գելային էլեկտրոֆորեզի միջև: Էլեկտրաֆորեզի տեխնիկայի ավարտից հետո բիոմոլեկուլները հետագայում մշակվում են՝ հիբրիդացման կամ այնպիսի մեթոդների միջոցով, ինչպիսիք են մատնահետքերը, ավելի բարձր մակարդակի տեղեկատվություն ստանալու համար:
Ներբեռնեք մազանոթային էլեկտրոֆորեզի PDF տարբերակը ընդդեմ գելային էլեկտրոֆորեզի
Դուք կարող եք ներբեռնել այս հոդվածի PDF տարբերակը և օգտագործել այն անցանց նպատակներով՝ ըստ մեջբերումների: Խնդրում ենք ներբեռնել PDF տարբերակը այստեղ Տարբերությունը գելային էլեկտրոֆորեզի և մազանոթային էլեկտրոֆորեզի միջև:
