Գելային ֆիլտրացիայի և մերձավոր քրոմատոգրաֆիայի միջև հիմնական տարբերությունն այն է, որ գել ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան կախված է անալիտի նմուշի մոլեկուլային քաշի կամ չափի տարբերությունից, մինչդեռ մերձավոր քրոմատոգրաֆիան կախված է անալիտի մերձությունից անշարժացված լիգանդի նկատմամբ:
Քրոմատոգրաֆիա տերմինը անալիտիկ քիմիայում վերաբերում է խառնուրդի մեջ բաղադրիչների տարանջատման գործընթացին՝ օգտագործելով տարբեր տեխնիկա: Քրոմատագրությունը կոլեկտիվ անուն է, որը ներկայացնում է տարանջատման մի շարք տարբեր մեթոդներ:
Ի՞նչ է գելային ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան:
Գելային ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան անալիտիկ տեխնիկա է, որի դեպքում բաղադրիչների տարանջատումը կախված է մոլեկուլային քաշի կամ չափի տարբերությունից: Այս տեխնիկան նաև հայտնի է որպես չափի բացառման քրոմատոգրաֆիա կամ մոլեկուլային մաղով քրոմատոգրաֆիա: Այս գործընթացում տարանջատման տեխնիկան կախված է նմուշի մոլեկուլների տարբեր կարողությունից՝ մտնելու գել-ֆիլտրման միջավայրի ծակոտիները:
Գելային ֆիլտրման տեխնիկայում ստացիոնար փուլը պարունակում է խոնավացված, սպունգի նման նյութի հատիկներ, որոնք ունեն մոլեկուլային չափերի ծակոտիներ, որոնք պարունակում են չափերի նեղ շրջանակ: Եթե այս «մոլեկուլային մաղերը» պարունակող սյունակի միջով անցկացնենք ջրային լուծույթ, որը բաղկացած է տարբեր չափերի մոլեկուլներից, մոլեկուլները, որոնք ավելի մեծ են, քան զտիչ միջավայրի ծակոտիները, արագ շարժվում են սյունակի միջով: Ի հակադրություն, ավելի փոքր մոլեկուլները մտնում են գելի ծակոտիները և հակված են դանդաղ շարժվել սյունակի միջով: Մոլեկուլները սյունից դուրս են գալիս մոլեկուլային չափի նվազման կարգով:Այստեղ գելի բացառման սահմանը ամենափոքր մոլեկուլների մոլեկուլային զանգվածն է, որոնք չեն կարողանում թափանցել տվյալ գելի ծակոտիները:
Գոյություն ունեն գելային ֆիլտրման տարբեր տեսակներ, ինչպիսիք են անուղղակի գելային ֆիլտրման մեթոդը, կայուն վիճակի գելային ֆիլտրումը, գել բշտիկի դիալիզը և այլն: Անուղղակի գելային ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան օգտակար է ազատ վահանաձև գեղձի հորմոնների որոշման համար: Գելային ֆիլտրացիայի կայուն քրոմատոգրաֆիան անուղղակի մեթոդ է, որն օգտագործվում է հիմնականում ազատ ստերոիդների չափման համար, ինչպիսիք են կորտիզոլը, տեստոստերոնը և այլն:
Ի՞նչ է մերձավոր քրոմատոգրաֆիան:
Աֆինիտե քրոմատոգրաֆիան անալիտիկ տեխնիկա է և տարանջատման մեթոդ, որը կախված է անշարժացված լիգանդի և նրա կապող գործընկերոջ միջև հատուկ կապող փոխազդեցությունից:Որոշ օրինակներ ներառում են հակամարմին-հակագին կապ, ֆերմենտ-սուբստրատ կապ և ֆերմենտ-ինհիբիտոր կապ: Հետևաբար, այս տեխնիկան շատ կարևոր կիրառություններ ունի նուկլեինաթթվի մաքրման, բջիջների էքստրակտներից սպիտակուցի մաքրման և արյունից մաքրման գործում:
Այս տեխնիկայում ամենակարևոր հատկությունը լիգանդի անշարժացումն է: Դրա համար մենք կարող ենք օգտագործել տարբեր նյութեր, ինչպիսիք են ակրիլատները և սիլիկա գելը: Կարևոր է կանխել թիրախային մոլեկուլի ստերիկ միջամտությունը լիգանդին: Ավելին, պինդ փուլին կցվում է արգելակիչ։ Մենք այս արգելակողին անվանում ենք spacer: Դասականորեն, spacer-ը բաղկացած է ածխաջրածնային շղթայից:
Աֆինիտային քրոմատագրության ստացիոնար փուլը պարունակում է միջուկ, միջուկ և լիգանդ:Երբեմն, այն ունի նաև մետաղական իոն, որը միացված է լիգանտին: Այս տեխնիկայի անշարժ փուլի համար առավել նախընտրելի պինդ փուլը ագարոզայի գելն է, քանի որ այն հեշտությամբ տարածվում է սյունը ցանկացած չափի խեժի շերտերով լցնելու և փաթեթավորելու համար, և այն բավականաչափ մեծ է, որպեսզի բիոմոլեկուլները ազատորեն հոսեն ուլունքների մեջ և միջով: Լիգանդները տարբեր ձևերով կարող են կովալենտորեն միանալ բշտիկի պոլիմերին: Ամենատարածված միջատային միացություններն են ցիանոգենի բրոմիդը, էպօքսիդը, էպօքսիդը C6 թթվով և դիամինը։ Մյուս կողմից, լիգանը, որը մենք կարող ենք օգտագործել, տարբերվում է ըստ թիրախի, օրինակ՝ հակամարմին-հակագին, երկաթի կամ ալյումինի իոններ-ֆոսֆոպրոտեիններ, ավիդին-բիոտին, գլուտատիոն-GST, chelator-His-պիտակավորված սպիտակուցներ և այլն:
Ո՞րն է տարբերությունը գելի ֆիլտրացիայի և մերձավոր քրոմատագրության միջև:
Քրոմատագրությունը կարևոր անալիտիկ տեխնիկա է: Գելային ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան և մերձեցման քրոմատոգրաֆիան քրոմատագրության երկու կարևոր տարբերակ են: Գելի ֆիլտրացիայի և մերձավոր քրոմատագրության հիմնական տարբերությունն այն է, որ գելային ֆիլտրացման քրոմատագրությունը կախված է անալիտի նմուշի մոլեկուլային քաշի կամ չափի տարբերություններից, մինչդեռ հարաբերակցության քրոմատոգրաֆիան կախված է անալիտի մերձեցումից անշարժացված լիգանդի նկատմամբ:
Ամփոփում – Գելային զտում ընդդեմ մերձեցման քրոմատոգրաֆիայի
Գոյություն ունեն տարբեր տեսակի քրոմատոգրաֆիկ մեթոդներ՝ ըստ դրանց կիրառման և անալիտի նմուշի բնույթի: Գելի ֆիլտրումը և մերձեցման քրոմատոգրաֆիան երկու նման տեսակի տեխնիկա են: Գելային ֆիլտրացիայի և մերձավորության քրոմատոգրաֆիայի հիմնական տարբերությունն այն է, որ գելային ֆիլտրացիոն քրոմատոգրաֆիան կախված է անալիտի նմուշի մոլեկուլային քաշի կամ չափի տարբերություններից, մինչդեռ մերձեցման քրոմատոգրաֆիան կախված է անշարժացված լիգանդի նկատմամբ անալիտի մերձությունից:
