Խմորիչ մեկ հիբրիդ և խմորիչ երկու հիբրիդ միջև հիմնական տարբերությունն այն է, որ խմորիչ մեկ հիբրիդը in vitro փորձարկում է ԴՆԹ-սպիտակուց փոխազդեցությունները վերլուծելու համար, մինչդեռ խմորիչ երկու հիբրիդը in vitro վրա հիմնված անալիզ է սպիտակուց-սպիտակուց փոխազդեցությունները վերլուծելու համար:
Բջջային մոլեկուլների փոխազդեցության ուսումնասիրությունը կարող է օգնել որոշել գեների արտահայտման և սպիտակուցային ուղիների մեջ ներգրավված ճանաչման վայրերը: ԴՆԹ-ի և սպիտակուցի փոխազդեցությունները անբաժանելի են բջջային գործընթացների համար, ինչպիսիք են ԴՆԹ-ի փոփոխությունները և տրանսկրիպցիոն կարգավորումը և այլն: Մյուս կողմից, սպիտակուցների և սպիտակուցների փոխազդեցությունները կենսական դեր են խաղում բջջային գործընթացներում, ինչպիսիք են վերարտադրությունը, տրանսկրիպցիան, թարգմանությունը և ազդանշանի փոխակերպումը:Հետևաբար, շատ կարևոր է բացահայտել բջջային մոլեկուլների այս փոխազդեցությունները տարբեր վերլուծությունների միջոցով: Խմորիչ մեկ հիբրիդը և խմորիչ երկու հիբրիդը երկու in vitro փորձարկումներ են՝ ԴՆԹ-սպիտակուց և սպիտակուց-սպիտակուց փոխազդեցությունները վերլուծելու համար:
Ի՞նչ է Yeast One Hybrid-ը:
Yeast one hybrid-ը (Y1H) in vitro-ի վրա հիմնված անալիզ է ներբջջային ԴՆԹ-սպիտակուց փոխազդեցությունների վերլուծության համար: Այս մեթոդն առաջին անգամ ստեղծվել է Վանգի և Ռիդի կողմից 1993 թվականին: Այդ ժամանակից ի վեր այն ավելի մեծ ուժ է ցույց տվել կենսաբանական հետազոտություններում: Այս վերլուծության մեջ կան երկու հիմնական բաղադրիչ՝ ԴՆԹ-ի խայծ և սպիտակուցային որս:
Նկար 01. խմորիչ մեկ հիբրիդ
Ընթացակարգում ԴՆԹ-ի հաջորդականությունը (ԴՆԹ-ի խայծ) սկզբում կլոնավորվում է երկու տարբեր թղթակիցների վերևում (HIS3, LacZ):Այս ռեպորտաժային կառուցվածքները ինտեգրված են խմորիչ շտամի գենոմի մեջ: Տրանսկրիպցիոն գործոնները վերցվում են որպես սպիտակուցային կեր։ Տրանսկրիպցիոն գործոնները միաձուլվում են խմորիչ Gal4 տրանսկրիպցիոն գործոնի տրանսկրիպցիոն ակտիվացման տիրույթին (AD)՝ հիբրիդային սպիտակուցներ ստանալու նպատակով: Այս ամբողջ հիբրիդային սպիտակուցը ինտեգրվում է պլազմիդի մեջ, նախքան այն ներմուծելը խմորիչի շտամում: Ռեկոմբինանտ պլազմիդի ներդրումից հետո, երբ տրանսկրիպցիոն գործոնը փոխազդում է ԴՆԹ-ի հատվածի հետ, AD մասնիկը ակտիվացնում է ռեպորտաժային գենի արտահայտությունը (HIS3or LacZ): Պլազմիդների հաջորդականությունը թույլ է տալիս նույնականացնել տրանսկրիպցիոն գործոնը, որը կարող է կապվել ԴՆԹ-ի հատվածին: Վերջերս հիվանդության ախտորոշման հետազոտության համար օգտագործվել է խմորիչ մեկ հիբրիդային մեթոդ: Հետևաբար, ապագայում այս վերլուծությունն ավելի լայն կիրառություն կունենա գիտական հետազոտությունների և բժշկական բուժման մեջ:
Ի՞նչ է Yeast Two Hybrid-ը:
Yeast two hybrid (Y2H) in vitro փորձարկում է, որը վերլուծում է ներբջջային սպիտակուցների և սպիտակուցների փոխազդեցությունները:Այս մեթոդն ի սկզբանե գտել են Սթենլի Ֆիլդսը և Օկ-Կյու Սոնգը 1989 թվականին: Այս տեխնիկան հայտնաբերում է սպիտակուցի և սպիտակուցի փոխազդեցությունը՝ օգտագործելով խմորիչի Gal4 տրանսկրիպցիոն գործոնը::
Նկար 02. խմորիչ երկու հիբրիդ
Այս մեթոդով նախ կառուցվում են երկու միաձուլումներ (հիբրիդներ)՝ օգտագործելով հետաքրքրող սպիտակուցները՝ մի սպիտակուցի միաձուլումը ԴՆԹ կապող տիրույթի (DBD) և մյուս սպիտակուցի միաձուլման միջոցով Gal4 տրանսկրիպցիոն գործոնի ակտիվացնող տիրույթի (AD) հետ։. DBD-ի հետ միաձուլված սպիտակուցը հայտնի է որպես խայծ, մինչդեռ AD-ի հետ միաձուլված սպիտակուցը հայտնի է որպես զոհ: Խմորիչի շտամում, խայծի և որսի փոխազդեցությունից հետո, DBD-ն և AD-ն մոտակայքում են՝ առաջացնելով ռեպորտաժային գենի վերևում գտնվող Gal4 տրանսկրիպցիոն գործոն:Ֆունկցիոնալ տրանսկրիպցիայի գործոնը ակտիվացնում է ռեպորտաժի գենի արտահայտությունը: Ավելին, այս մեթոդը ներկայումս օգտագործվում է կաթնասունների բջիջներում ինտեգրալ թաղանթային սպիտակուցների փոխազդեցության ստուգման համար:
Որո՞նք են նմանությունները Yeast One Hybrid-ի և Yeast Two Hybrid-ի միջև:
- Yeast one hybrid and yeast two hybrid-ը երկու in vitro անալիզներ են՝ ԴՆԹ-սպիտակուց և սպիտակուց-սպիտակուց փոխազդեցությունները վերլուծելու համար:
- Այս անալիզները օգտագործում են խմորիչի շտամներ:
- Երկու վերլուծություններն օգտագործում են Gal4 տառադարձման գործոնի ակտիվացման տիրույթը (AD):
- Նրանք օգտագործում են զեկուցող գենի (HIS3 կամ LacZ) արտահայտությունը փոխազդեցությունները հայտնաբերելու համար:
- Նրանք ունեն խայծ և որս։
- Երկու վերլուծությունները շատ օգտակար են ժամանակակից կենսաբանական հետազոտություններում:
Ո՞րն է տարբերությունը խմորիչ մեկ հիբրիդից և խմորիչ երկու հիբրիդից:
Yeast one hybrid-ը in vitro-ի վրա հիմնված անալիզ է՝ ԴՆԹ-ի և սպիտակուցի փոխազդեցությունները վերլուծելու համար, մինչդեռ խմորիչ երկու հիբրիդը in vitro վրա հիմնված անալիզ է՝ սպիտակուցների և սպիտակուցների փոխազդեցությունները վերլուծելու համար:Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է խմորիչ մեկ հիբրիդից և խմորիչ երկու հիբրիդից: Ավելին, խմորիչ մեկ հիբրիդում խայծը ԴՆԹ-ի բեկոր է, իսկ որսը սպիտակուցի մոլեկուլ է: Մյուս կողմից, խմորիչ երկու հիբրիդում և՛ խայծը, և՛ որսը սպիտակուցային մոլեկուլներ են:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ցույց է տալիս խմորիչ մեկ հիբրիդ և խմորիչ երկու հիբրիդ միջև տարբերությունները աղյուսակային տեսքով՝ կողք կողքի համեմատելու համար:
Ամփոփում – Yeast One Hybrid vs Yeast Two Hybrid
Խմորիչ մեկ հիբրիդ և խմորիչ երկու հիբրիդ երկու կարևոր in vitro փորձարկումներ են: Yeast one hybrid-ը in vitro-ի վրա հիմնված վերլուծություն է ԴՆԹ-ի և սպիտակուցի փոխազդեցությունները վերլուծելու համար, մինչդեռ խմորիչ երկու հիբրիդը in vitro-ի վրա հիմնված վերլուծություն է սպիտակուցի և սպիտակուցի փոխազդեցությունների վերլուծության համար: Այսպիսով, սա հիմնական տարբերությունն է խմորիչ մեկ հիբրիդից և խմորիչ երկու հիբրիդից:
