PBR322-ի և pUC19-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ pBR322-ը պլազմիդային վեկտոր է, որն ունի 4361 բազային զույգ երկարություն, մինչդեռ pUC19-ը պլազմիդային վեկտոր է, որի երկարությունը կազմում է 2686 բազային զույգ:
Կլոնավորման վեկտորը ԴՆԹ-ի փոքր կտոր է, որը կարող է կայուն պահպանվել օրգանիզմում: Այն նաև ԴՆԹ-ի փոքր կտոր է, որի մեջ կարելի է կլոնավորման նպատակով տեղադրել ԴՆԹ-ի օտար բեկոր: Վեկտորը պարունակում է կարևոր առանձնահատկություններ, որոնք թույլ են տալիս օտարերկրյա ԴՆԹ-ի բեկորների հարմար տեղադրումը վեկտորների մեջ, ինչպիսիք են սահմանափակման վայրերը, ընտրվող մարկերը, ռեպորտաժի գենը և արտահայտման տարրը: Կլոնավորումն առաջին անգամ իրականացվել է Է.coli. E. coli-ի կլոնավորման վեկտորները ներառում են պլազմիդներ, բակտերիոֆագներ, կոսմիդներ և բակտերիալ արհեստական քրոմոսոմներ (BAC): Առավել հաճախ օգտագործվող վեկտորները գենետիկորեն մշակված պլազմիդներն են: pBR322-ը և pUC19-ը պլազմիդային վեկտորների երկու տեսակ են:
Ինչ է pBR322?
pBR322-ը պլազմիդային վեկտոր է: Այն E. coli-ի կլոնավորման առաջին լայնորեն օգտագործվող վեկտորներից է: Այս վեկտորն առաջին անգամ ստեղծվել է 1977 թվականին Սան Ֆրանցիսկոյի Կալիֆոռնիայի համալսարանի Հերբերտ Բոյերի լաբորատորիայում: Դա շրջանաձև երկշղթա ԴՆԹ է, որն ունի 4361 բազային զույգ երկարություն։
Նկար 01. pBR322
Այս պլազմիդային վեկտորն ունի հատուկ առանձնահատկություններ: Սովորաբար, այն ունի հակաբիոտիկների նկատմամբ կայունության երկու գեն՝ գեն bla, որը կոդավորում է ամպիցիլինի դիմադրությունը (AmpR) սպիտակուց և tetA գեն, որը կոդավորում է տետրացիկլինի դիմադրությունը (TetR) սպիտակուց. Ավելին, այն պարունակում է pMB1-ի վերարտադրության ծագումը: Այս պլազմիդային վեկտորն ունի նաև rop գեն, որը կոդավորում է պլազմիդային պատճենների թվի սահմանափակիչը: Ավելին, այս վեկտորն ունի եզակի սահմանափակման վայրեր ավելի քան 40 սահմանափակող ֆերմենտների համար: Այդ քառասուն սահմանափակման վայրերից տասնմեկը գտնվում են TetR գենի մեջ: Կան երկու սահմանափակման վայրեր HindIII և ClaI սահմանափակող ֆերմենտների համար TetR գենի խթանիչում: Ավելին, AmpR գենում կան վեց շատ կարևոր սահմանափակման վայրեր: pBR322-ը ցածր պատճենների թվով կլոնավորման վեկտոր է: Այն մոտավորապես ապահովում է 20 պլազմիդի պատճեն յուրաքանչյուր բակտերիալ բջջի համար: Վեկտորի մոլեկուլային զանգվածը 2,83×106 դալտոն է։
Ինչ է pUC19?
pUC19-ը պլազմիդային վեկտոր է, որն ունի 2686 բազային զույգ երկարություն։ Այն պլազմիդային վեկտորների շարքից է, որոնք ստեղծվել են Յոահիմ Մեսինգի և նրա գործընկերների կողմից։ Այս պլազմիդային շարքի վրա վաղ աշխատանքն իրականացվել է Կալիֆորնիայի համալսարանում: Դա շրջանաձև երկշղթա ԴՆԹ է։
Նկար 02. pUC19
Այս պլազմիդային վեկտորը պարունակում է նաև կարևոր առանձնահատկություններ: Այն ունի β գլակտոզիդազ (lacz) գենի N տերմինալ հատված։ Այն ունի նաև բազմակի կլոնավորման տեղամաս (MCS): Այս շրջանը բաժանված է lacz գենի 6-րդ և 7-րդ կոդոնների: MCS տարածաշրջանն ապահովում է բազմաթիվ սահմանափակման էնդոնուկլեազների սահմանափակման վայրեր: Բացի β գլակտոզիդազ գենից, pUC19-ը նաև կոդավորում է ամպիցիլինի դիմադրության գենը (AmpR): Ավելին, վերարտադրության սկզբնաղբյուրը ստացվում է pMB1 պլազմիդից: Չնայած pUC19-ը փոքր է չափերով, այն ունի կրկնօրինակների մեծ քանակ (500-700 օրինակ յուրաքանչյուր բակտերիաների բջջի համար): Այս պլազմիդային վեկտորի մոլեկուլային քաշը 1,75×106 դալտոն է:
Որո՞նք են նմանությունները pBR322-ի և pUC19-ի միջև:
- pBR322 և pUC19 պլազմիդային վեկտորների երկու տեսակ են:
- Դրանք հայտնի կլոնավորման վեկտորներ են կոլիի համար:
- Երկու պլազմիդ վեկտորներն ունեն pMB1 պլազմիդի վերարտադրության նույն սկզբնաղբյուրը։
- Այս վեկտորները ունեն բազմաթիվ սահմանափակման կայքեր:
- Երկու պլազմիդ վեկտորներն ունեն ամպիցիլինի դիմադրության գեն՝ որպես ընտրելի մարկեր:
Ո՞րն է տարբերությունը pBR322-ի և pUC19-ի միջև:
pBR322-ը պլազմիդային վեկտոր է, որն ունի 4361 բազային զույգ երկարություն, մինչդեռ pUC19-ը պլազմիդային վեկտոր է, որն ունի 2686 բազային զույգ երկարություն։ Այսպիսով, սա pBR322-ի և pUC19-ի հիմնական տարբերությունն է: Ավելին, pBR322-ը ցածր պատճենների թվով պլազմիդ վեկտոր է, մինչդեռ pUC19-ը բարձր պատճենների թվով պլազմիդ վեկտոր է:
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ներկայացնում է pBR322-ի և pUC19-ի տարբերությունները աղյուսակային տեսքով՝ կողք կողքի համեմատելու համար:
Ամփոփում – pBR322 vs pUC19
E.coli-ի կլոնավորման առավել հաճախ օգտագործվող վեկտորները գենետիկորեն մշակված պլազմիդներն են:pBR322-ը և pUC19-ը պլազմիդային վեկտորների երկու տեսակ են: pBR322-ը պլազմիդային վեկտոր է, որն ունի 4361 բազային զույգ երկարություն, մինչդեռ pUC19-ը պլազմիդային վեկտոր է, որի երկարությունը կազմում է 2686 բազային զույգ։ Այսպիսով, սա է հիմնական տարբերությունը pBR322-ի և pUC19-ի միջև:
