Էլեկտրոպորացիայի և միկրոներարկման հիմնական տարբերությունն այն է, որ էլեկտրոպորացիան տեխնիկա է, որն օգտագործում է բարձր լարման էլեկտրական իմպուլս՝ ԴՆԹ-ն հյուրընկալող բջիջներ հասցնելու համար, մինչդեռ միկրոներարկումը տեխնիկա է, որն օգտագործում է բարակ ծայրով ապակե ասեղ կամ միկրոպիպետ՝ ԴՆԹ-ն հասցնելու համար։ ընդունող բջիջներ։
Տրանսֆորմացիան այն գործընթացն է, որով օտար ԴՆԹ-ն փոխանցվում է հյուրընկալող բջիջներին: Փոխակերպմամբ օրգանիզմի գենետիկական կառուցվածքը կարող է փոփոխվել։ Կան քիմիական, կենսաբանական և ֆիզիկական փոխակերպման տարբեր մեթոդներ: Ոմանք ուղղակի մեթոդներ են, մինչդեռ որոշները անուղղակի մեթոդներ են: Էլեկտրոպորացիան և միկրոներարկումը երկու ֆիզիկական մեթոդներ են, որոնք ուղղակի փոխակերպման մեթոդներ են:Էլեկտրոպորացիան օգտագործում է էլեկտրական դաշտ՝ կենսաբանական բջիջների մեմբրաններում միկրոսկոպիկ ծակոտիներ առաջացնելու համար՝ ԴՆԹ-ն հյուրընկալող բջիջներում ներառելու համար: Մյուս կողմից, միկրոներարկումն ուղղակիորեն փոխանցում է ԴՆԹ՝ օգտագործելով միկրոպիպետ կամ բարակ ծայրով ապակե ասեղ:
Ի՞նչ է էլեկտրոպորացիան:
Electroporation-ը փոխակերպման տեխնիկա է, որը ԴՆԹ-ն փոխանցում է բույսերի բջիջներին և պրոտոպլաստներին: Այս տեխնիկան օգտագործում է բարձր լարման էլեկտրական իմպուլս: Բուսական նյութերը ինկուբացվում են բուֆերային լուծույթում, որն ունի ԴՆԹ: Այնուհետեւ լուծումը ենթարկվում է բարձր լարման էլեկտրական իմպուլսի: Բարձր լարման առաջացրած ծակոտիները ստեղծվում են բույսերի բջջային թաղանթներում, և այդ ծակոտիների միջոցով ԴՆԹ-ն գաղթում է բջիջների ներսում և ինտեգրվում բույսերի գենոմային ԴՆԹ-ին: Այս մեթոդի արդյունավետությունը կախված է բույսերի նյութերից և բուժման պայմաններից:
Գծապատկեր 01. Էլեկտրաբորացիա
Երբ փոխակերպումն իրականացվում է էլեկտրապորացիայի միջոցով, բջիջների միայն 40-50%-ն է ստանում ԴՆԹ: Ավելին, վերափոխված բջիջների միայն 50%-ը կարող է գոյատևել այս մեթոդով։ Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը հեշտ է կատարել և չի փոխում բջիջների կենսաբանական կառուցվածքը կամ գործառույթը: Ավելին, այն կարող է օգտագործվել բջիջների լայն շրջանակի համար:
Ի՞նչ է միկրոներարկումը:
Միկրոներարկումը փոխակերպման տեխնիկա է, որը հատկապես օգտակար է ԴՆԹ-ն մեծ բջիջներ ներմուծելիս: Այս մեթոդը օգտագործում է բարակ ծայրով ապակե ասեղ կամ միկրոպիպետ՝ ԴՆԹ-ն բույսերի պրոտոպլաստներին կամ կենդանական բջիջներին (օվոցիտներ, ձու և սաղմ) հասցնելու համար: Իրականում այս մեթոդն ավելի հարմար է տրանսգենային կենդանիների, օրինակ՝ մկների պատրաստման համար։ Այս մեթոդով ԴՆԹ-ն ուղղակիորեն մտնում է միջուկի կամ ցիտոպլազմայի մեջ:
Ինչպես էլեկտրոպորացիան, միկրոներարկումն ուղղակի փոխակերպման տեխնիկա է: Միկրոներարկումն իրականացվում է մասնագիտացված մանրադիտակի տակ:Պիպետտի, ասեղի, մանրադիտակի բեմի և վիդեո տեխնոլոգիայի համակարգչային կառավարումը մեծացրել է այս տեխնիկայի արդյունավետությունը: ԴՆԹ-ի ներարկումների ժամանակ ներկ կարող է օգտագործվել փոխակերպված բջիջները հեշտությամբ բացահայտելու համար: Ուստի փոխակերպված բջիջները նույնականացնելու համար առանձին մեթոդ օգտագործելու կարիք չկա: Ամենակարևորը, միկրոներարկման ընթացակարգը չի պահանջում մարկերային գեն:
Նկար 02. Միկրոներարկում
Ավելին, այս մեթոդը շատ արդյունավետ է և վերարտադրելի։ Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը ծախսատար է, ժամանակատար և պահանջվում է հմուտ անձնավորություն: Բացի այդ, միայն փոքր թվով բջիջներ կարող են բուժվել այս մեթոդով:
Որո՞նք են նմանությունները էլեկտրոպորացիայի և միկրոներարկման միջև:
- Եվ էլեկտրափորացումը և միկրոներարկումը փոխակերպման երկու տեսակի տեխնիկա են:
- Այս մեթոդները ԴՆԹ-ն փոխանցում են բույսերի բջիջներին և պրոտոպլաստներին:
- Դրանք ուղղակի մեթոդներ են։
- Ավելին, դրանք ֆիզիկական կամ մեխանիկական մեթոդներ են։
- Երկու մեթոդներն էլ օգտակար են տրանսգենային բույսերի և կենդանիների արտադրության ժամանակ:
Ո՞րն է տարբերությունը էլեկտրոպորացիայի և միկրոներարկման միջև:
Electroporation տեխնիկան օգտագործում է էլեկտրական դաշտ՝ ԴՆԹ ներմուծելու համար, մինչդեռ միկրոներարկման տեխնիկան միկրոպիպետ է կամ բարակ ծայրով ապակե ասեղ՝ ԴՆԹ ներմուծելու համար: Այսպիսով, սա էլեկտրոպորացիայի և միկրոներարկման հիմնական տարբերությունն է: Ավելին, էլեկտրոպորացիան հիմնականում օգտագործվում է բույսերի բջիջների և պրոտոպլաստների համար, մինչդեռ միկրոներարկումը հիմնականում օգտագործվում է կենդանական բջիջների համար: Բացի այդ, էլեկտրոպորացիան այնքան ժամանակատար չէ, որքան միկրոներարկումը։
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ամփոփում է էլեկտրապորացիայի և միկրոներարկման միջև եղած տարբերությունները աղյուսակային տեսքով:
Ամփոփում – Էլեկտրապորացիա ընդդեմ միկրոներարկում
Electroporation-ը և microinjection-ը գեների փոխանցման երկու ֆիզիկական մեթոդներ են: Էլեկտրոպորացիան օգտագործում է բարձր լարման էլեկտրական դաշտ, մինչդեռ միկրոներարկումն օգտագործում է ապակե ասեղ կամ միկրոպիպետ: Այսպիսով, սա էլեկտրոպորացիայի և միկրոներարկման հիմնական տարբերությունն է: Այնուամենայնիվ, երկու մեթոդներն էլ ուղղակիորեն ներմուծում են էկզոգեն ԴՆԹ հյուրընկալող բջիջներում:
