RP HPLC-ի և HIC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ RP HPLC-ն օգտագործում է ավելի բևեռային շարժական փուլ և ավելի քիչ բևեռային ստացիոնար փուլ: Մինչդեռ HIC-ն օգտագործում է հիդրոֆոբ ստացիոնար փուլ, որը թույլ է տալիս հիդրոֆոբ մոլեկուլներին միանալ դրան:
Քրոմատոգրաֆիան անալիտիկ տեխնիկա է, որն օգնում է խառնուրդը բաժանել իր բաղադրիչների: Նախ պետք է լուծարենք լուծույթի մեջ բաժանվող նմուշը: Այս լուծույթ-նյութի խառնուրդը կոչվում է շարժական փուլ։ Այնուհետև շարժական փուլն անցնում է մեկ այլ նյութի միջով, որը կոչվում է անշարժ փուլ: Ստացիոնար փուլը որոշում է բաղադրիչների տարանջատումը: Տարանջատումը տեղի է ունենում շարժական և անշարժ փուլի միջև նյութի բաժանման պատճառով:
Ի՞նչ է RP HPLC-ն:
RP HPLC տերմինը նշանակում է հակադարձ փուլային բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրություն: Այն ներառում է բաղադրիչների բաժանումը խառնուրդի մեջ՝ ըստ հիդրոֆոբության։ Շարժական փուլի հիդրոֆոբ բաղադրիչները կապվում են անշարժացված հիդրոֆոբ լիգանների հետ անշարժ փուլի վրա, մինչդեռ հիդրոֆիլ բաղադրիչներն անցնում են անշարժ փուլի միջով՝ չկպվելով անշարժ փուլի մակերեսին::
Նկար 01. HPLC սարք
Ավելին, այս մեթոդն ունի ավելի շատ վերարտադրելիություն՝ համեմատած այլ քրոմատոգրաֆիկ մեթոդների հետ, և այն ցույց է տալիս նաև լայն կիրառելիություն: Հետևաբար, մենք օգտագործում ենք այս մեթոդը լաբորատորիաներում HPLC-ի բոլոր մեթոդների ավելի քան 75%-ի համար: Ժամանակի մեծ մասը որպես շարժական փուլ մենք օգտագործում ենք ջրի ջրային խառնուրդ՝ խառնվող բևեռային օրգանական լուծիչով:Այսպիսով, այն կապահովի լուծույթի հիդրոֆոբ բաղադրիչների կցումը ստացիոնար փուլի մակերեսին։
Ի՞նչ է HIC-ը:
HIC տերմինը նշանակում է հիդրոֆոբ փոխազդեցության քրոմատագրություն: Այն հակադարձ փուլային HPLC-ի տեսակ է, և այս մեթոդը հիմնականում օգտագործվում է խոշոր կենսամոլեկուլների, օրինակ՝ սպիտակուցների առանձնացման համար։ Այս մեթոդով կենսամոլեկուլի նմուշը պատրաստելու համար անհրաժեշտ է օգտագործել ջրային միջավայր: Դա պայմանավորված է նրանով, որ օրգանական լուծիչները կարող են առաջացնել սպիտակուցների դենատուրացիա: Ավելին, այս տեխնիկան օգտագործում է մեծ մոլեկուլների փոխազդեցությունը ստացիոնար փուլի մի փոքր հիդրոֆոբ մակերեսով: Ավելին, նմուշում մենք պետք է օգտագործենք աղի բարձր կոնցենտրացիան, քանի որ այն խթանում է սպիտակուցի պահպանումը փաթեթավորման վրա. այս գործընթացը կոչվում է աղակալում: Աստիճանաբար նվազեցնելով աղի կոնցենտրացիան՝ մենք կարող ենք ստիպել բիոմոլեկուլներին առանձին զտել՝ ըստ դրանց հիդրոֆոբության։
Սովորաբար այս մեթոդը օգտագործում է իոնափոխանակման քրոմատոգրաֆիայի պայմաններին հակառակ պայմանները:Այս տեխնիկայում, նախ, մենք պետք է բուֆերային լուծույթ անցկացնենք սյունակի միջով, որպեսզի նվազեցնենք լուծվող նյութի լուծույթը նմուշում: Այն ստիպում է սպիտակուցի հիդրոֆոբ շրջանները բացահայտել: Այնուամենայնիվ, երբ մոլեկուլն ավելի հիդրոֆոբ է, ավելի քիչ աղ է պահանջվում կապը խթանելու համար: Այստեղ սկզբում լուծվում են ավելի քիչ հիդրոֆոբ լուծույթները, իսկ ըստ աղի կոնցենտրացիայի փոփոխության՝ ավելի շատ հիդրոֆոբ լուծույթներ են լուծվում վերջինը։
Ո՞րն է տարբերությունը RP HPLC-ի և HIC-ի միջև:
Քրոմատոգրաֆիան խառնուրդում բաղադրիչների տարանջատման անալիտիկ տեխնիկա է: RP HPLC-ն և HIC-ը երկու մասնագիտացված քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա են: RP HPLC-ի և HIC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ RP HPLC-ն օգտագործում է ավելի բևեռային շարժական և ավելի քիչ բևեռային ստացիոնար փուլ, մինչդեռ HIC-ն օգտագործում է հիդրոֆոբ ստացիոնար փուլ, որը թույլ է տալիս հիդրոֆոբ մոլեկուլներին միանալ դրա վրա::
Ստորև բերված ինֆոգրաֆիկան ամփոփում է տարբերությունը RP HPLC-ի և HIC-ի միջև:
Ամփոփում – RP HPLC ընդդեմ HIC
Քրոմատոգրաֆիան խառնուրդում բաղադրիչների տարանջատման անալիտիկ տեխնիկա է: RP HPLC-ն և HIC-ը երկու մասնագիտացված քրոմատոգրաֆիկ տեխնիկա են: RP HPLC-ի և HIC-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ RP HPLC-ն օգտագործում է ավելի բևեռային շարժական փուլ և ավելի քիչ բևեռային ստացիոնար փուլ, մինչդեռ HIC-ն օգտագործում է հիդրոֆոբ ստացիոնար փուլ, որը թույլ է տալիս հիդրոֆոբ մոլեկուլներին միանալ դրան::
