Հիմնական տարբերություն – Ուղղակի ընդդեմ անուղղակի ELISA
Ֆերմենտի հետ կապված իմունովերլուծությունը (ELISA), որը նաև հայտնի է որպես ֆերմենտային իմունովերլուծություն, շճաբանական թեստ է, որը հայտնաբերում է հակամարմինները արյան մեջ: Այն օգտագործվում է որպես ախտորոշիչ գործիք՝ պարզելու, թե արդյոք հիվանդը ենթարկվել է որոշակի տեսակի վիրուսի կամ այլ վարակիչ նյութի (հակագենի), և արդյոք օրգանիզմը հակամարմիններ է արտադրել վարակի դեմ։ ELISA-ն կարող է նաև բացահայտել անցյալ և ներկա վարակները: Հետևաբար, ELISA-ն հաճախ օգտագործվում է որպես նախաքննական թեստ բժիշկների կողմից՝ նախքան հիվանդությունների խորը վերլուծությունը: Այս հետազոտությունը կարող է իրականացվել լաբորատոր պայմաններում՝ հիվանդից արյան նմուշ վերցնելով։Գոյություն ունեն ELISA թեստի երկու տեսակ՝ ուղղակի ELISA և անուղղակի ELISA: Ուղղակի և անուղղակի ELISA-ի հիմնական տարբերությունն այն է, որ անուղղակի ELISA-ն ավելի զգայուն է և պահանջում է երկրորդական հակամարմինի ավելացում, մինչդեռ ուղղակի ELISA-ն ավելի քիչ զգայուն է և օգտագործում է միայն առաջնային հակամարմին::
Ի՞նչ է Direct ELISA:
ELISA-ն հիվանդության ախտորոշիչ թեստ է, որն իրականացվում է արյան մեջ որոշակի անտիգենների կամ հակամարմինների առկայությունը պարզելու համար: Այն կատարվում է որպես ափսեի վերլուծություն: Այն օգտագործում է հակամարմիններ, որոնք կապված են հեշտությամբ վերլուծվող ֆերմենտների հետ: Հակագենների առկայությունը շիճուկի նմուշում կապված է հատուկ հակամարմինների հետ՝ կապված ֆերմենտների հետ: Վերջնական փուլում ավելացվում է հատուկ սուբստրատ՝ ֆերմենտի հետ արձագանքելու համար: Ֆերմենտը սուբստրատը վերածում է գունավոր կամ ազդանշան արտադրող արտադրանքի: Քիմիական սուբստրատի գույնի փոփոխությունը բացահայտում է շիճուկի նմուշում որոշակի հակամարմինների առկայությունը: Ուղղակի ELISA թեստը օգտագործում է միայն ֆերմենտի հետ կապված առաջնային հակամարմին: Անտիգենին միանալուց հետո այն արագ փոխում է գույնը, ինչը վկայում է արյան մեջ վարակիչ նյութի առկայության մասին:Այնուամենայնիվ, ազդանշանների ինտենսիվությունը ավելի թույլ է ուղղակի ELISA-ում, քանի որ էպիտոպները սահմանափակված են անտիգենների հետ կապով: Հետևաբար, ուղղակի ELISA-ն ավելի քիչ զգայուն է՝ համեմատած անուղղակի ELISA-ի հետ:
Նկար 01. Ուղղակի ELISA թեստ
Ի՞նչ է անուղղակի ELISA:
ELISA-ն կարող է իրականացվել երկու տեսակի հակամարմինների միջոցով, մասնավորապես. առաջնային և երկրորդային հակամարմիններ: Անուղղակի ELISA գործիքն օգտագործում է երկու տեսակի հակամարմիններ՝ ազդանշաններն ավելի լավ հայտնաբերման համար ուժեղացնելու համար: Անուղղակի ELISA տեխնիկան իրականացվում է հետևյալ կերպ.
- Թիթեղները ինկուբացվում են անտիգեններով և լվանում, որպեսզի արգելափակեն ոչ սպեցիֆիկ կապը:
- Այնուհետև ավելացնում են առաջնային հակամարմինները և լվանում։
- Ֆերմենտի հետ կապված երկրորդական հակամարմինները ավելացվում են և լվանում:
- Ավելացվում է սուբստրատ և թույլատրվում է արձագանքել ֆերմենտների հետ:
- Ազդանշանները հայտնաբերվում են, և նմուշում բացահայտվում է հատուկ հակագենի առկայությունը կամ բացակայությունը:
Անուղղակի ELISA թեստի ժամանակ մի քանի երկրորդական հակամարմիններ կարող են կապվել մեկ առաջնային հակամարմինի հետ: Երկրորդային հակամարմինները կապված են հեշտությամբ վերլուծվող ֆերմենտների հետ: Հետևաբար, մեկ կապը կարող է ուժեղ ազդանշան տալ մեկից ավելի փոխազդեցությունների պատճառով: Հետևաբար, անուղղակի ELISA-ն ավելի զգայուն է, քան ուղղակի ELISA-ն: Այնուամենայնիվ, անուղղակի ELISA-ն կարող է ոչ սպեցիֆիկ ազդանշաններ տալ երկրորդական հակամարմինների խաչաձև ռեակցիաների պատճառով:
Նկար 02. Անուղղակի ELISA թեստ
Ո՞րն է տարբերությունը ուղղակի և անուղղակի ELISA-ի միջև:
Ուղիղ ընդդեմ անուղղակի ELISA |
|
| Ուղիղ ELISA-ն ավելի քիչ զգայուն է անուղղակի ELISA-ի համեմատ: | Անուղղակի ELISA-ն ավելի զգայուն է: |
| Տրված ժամանակը | |
| Ուղիղ ELISA թեստը արագ գործընթաց է: | Անուղղակի ELISA-ն ժամանակատար է: |
| Հակամարմինների օգտագործում | |
| Միայն մեկ տեսակի հակամարմիններ (առաջնային հակամարմիններ) օգտագործվում են ուղղակի ELISA-ում: | Առաջնային և երկրորդային հակամարմինները օգտագործվում են անուղղակի ELISA-ի համար: |
| Հղում ֆերմենտների հետ | |
| Առաջնային հակամարմինները կապված են ֆերմենտների հետ: | Երկրորդային հակամարմինները կապված են ֆերմենտների հետ: |
| Երկրորդ հակամարմինների խաչաձև ռեակտիվություն | |
| Ուղիղ ELISA-ն վերացնում է երկրորդ հակամարմինների խաչաձև ռեակտիվությունը: | Անուղղակի ELISA-ն ազդում է երկրորդ հակամարմինների խաչաձև ռեակտիվությամբ: |
| ազդանշաններ | |
| Ազդանշանները թույլ են համեմատած անուղղակի ELISA-ի հետ: | Ազդանշանները ուժեղացվում են անուղղակի ELISA-ում: Հետևաբար, այն հեշտ է հայտնաբերել։ |
Ամփոփում – Ուղղակի ընդդեմ անուղղակի ELISA
ELISA-ն կենսաքիմիական տեխնիկա է, որն օգտագործվում է հիմնականում իմունոլոգիայում՝ հիվանդի արյան նմուշում հակամարմինների կամ հակագենի առկայությունը հայտնաբերելու համար: Այն կարող է իրականացվել երկու գործընթացների միջոցով, որոնք հայտնի են որպես ուղղակի կամ անուղղակի ELISA: Ուղղակի ELISA թեստը օգտագործում է միայն առաջնային հակամարմիններ՝ հակագենը հայտնաբերելու համար, մինչդեռ անուղղակի ELISA-ն օգտագործում է ինչպես առաջնային, այնպես էլ երկրորդական հակամարմիններ:Ուղղակի ELISA-ում առաջնային հակամարմինները պիտակավորված են, մինչդեռ անուղղակի ELISA-ում երկրորդական հակամարմինները պիտակավորված են: Սա է տարբերությունը ուղղակի և անուղղակի ELISA-ի միջև:
